发芽试验的目的是测定种子批的最大发芽潜力,据此可比较不同种子批的质量, 也可估测田间播种价值。发芽率已作为世界各国制定种子质量标准的主要指标, 在种子认证和种子检验中得到广泛应用。现以常用的砂床为例, 谈谈室内发芽试验中易出现的问题及相应对策, 以减少实验误差, 准确反映种子发芽率。
1 试验用砂
有些种子经营部门的检验室, 检验用砂从建筑工地取来后, 只将明显的大块拣出, 不进行洗涤、消毒、过筛就直接用来做发芽试验; 有的采用开水烫、在太阳下暴晒或用铁锅炒等简单方法进行消毒, 这些方法不能完全杀死病菌, 使畸形苗产生的几率大且易造成次生感染, 造成发芽结果不准确。
正确的方法应该是选用无任何化学药物污染的细砂并做以下处理:
1.1 洗涤: 拣去较大的石子和杂物后用清水洗涤。1.2 消毒: 将洗净的湿砂放在铁盘内薄摊, 在 130 ～170 ℃高温下烘干约两小时;
1.3 过筛: 用孔径为 0.80 ㎜和 0.05 ㎜的圆孔筛两个,将烘干的砂子过筛, 取出两层筛之间的砂子, 即直径为 0.05 ～0.80 ㎜的砂粒作为发芽介质。这样大小的砂粒既具有足够的持水力, 又能保持一定的空隙, 以利通气。
一般情况下, 砂可重复使用。在重复使用前, 应洗净, 重新消毒。但化学药品处理过的种子发芽所用的砂子, 不能重复使用。
2 水分
在发芽试验过程中, 拌砂和苗期需要对水分进行控制。在实际操作中往往出现以下问题: (1)将干砂倒入培养盒, 然后加水拌匀。这种拌法往往造成砂中水分多且不均匀, 空隙小, 氧气不充足, 发芽差甚至不发芽。(2)在苗期加水时, 对于不同作物的种子加水次数和量一样多, 易造成有的作物种的种子畸形苗多, 腐烂苗多。(3)发芽箱体内的湿度大小往往被忽视, 湿度容易高出要求, 影响幼苗正常发芽。
为防止以上问题发生, 可采取以下措施: (1) 加水拌匀, 调配适宜含水量。一般加水量为其饱和含水量的 60 % ～80 %。通常也可采用简便方法调配, 即 100g 干砂中加入 18 ～26 mL 的水, 充分拌匀后达到手捏成团、放手即散开为度, 分放入培养盒中。(2) 不同作物的种子对水分的需求有差异, 有些种子如烟草、西瓜、大豆、大麦、棉花、菠菜等种子对水分较敏感, 砂床含水量要低些, 在置床 3 ～4 天内即幼苗未拱出砂面时不宜加水, 等幼苗露出砂面后要每天适量加水, 但每次不宜多。加水时最好用洗瓶, 沿培养盒的四周加入, 这样有利于幼苗从根部吸水, 且不影响幼苗呼吸。(3) 最好采用人工气候培养箱进行培养。若发芽箱没有内置湿度计, 应在箱体内放置一支湿度计, 将湿度严格控制在 70 % ～80 %, 若太高须将箱门打开进行通风透气。
3 砂床厚度
在实际操作中, 砂床的厚度掌握不好也会影响发芽率。铺得过薄, 影响根系正常发育, 易产生不正常幼苗。盖得过少, 容易翘根。盖得过厚, 影响幼苗拱出。因此, 要将拌好的湿砂装入培养盒 2 ～4 cm 厚, 具体厚度根据不同作物种子而异。如根系不发达, 可适当薄点, 根系发达的可适当厚点。播上种子后覆盖上 1 ～2cm 厚的松散湿砂, 粒大的种子可适当厚点, 粒小的种子可适量薄点。
4 种子间距
在置床时, 有的检验员将 100 粒种子数好后直接撒入砂床中, 这样造成种子间距不均匀, 一旦有发霉种子就易引起相互感染, 影响正常发芽率。
针对这个问题, 在置床时应将种子均匀分布在发芽床上, 种子之间留有 1 ～5 倍间距。一般小中粒种子( 如油菜、结球白菜、小麦、水稻等) 以 100 粒为一个重复, 试验为 4 个重复; 大粒种子( 如玉米、大豆、棉花等) 以 50 粒为一个重复, 试验为 8 个副重复; 特大粒种子( 如花生、蚕豆等) 以 25 粒为一个副重复, 试验为16 个副重复。
5 培养时间
在培养时间上往往出现以下两种情况: 一是到了GB/T3543.4- 1995 表 1 规定的天数时, 虽然只有几粒种子出苗, 也不再延长发芽时间, 即终止发芽试验; 二是不按规定随意延长发芽时间, 这样易造成发芽率不准确。如果样品在规定试验时间内只有几粒种子发芽, 应将试验时间延长 7 天或规定时间的一半, 所延长的时间不能随意定。
6 观察记数
在幼苗培养过程中, 没有把带病幼苗及时从发芽床中除去, 造成邻近苗相互感染, 影响幼苗正常生长,造成试验误差, 使结果不准确。因此, 在初次计数时,把发育良好的正常幼苗从砂床中拣出, 严重腐烂的幼苗或发霉的死种子及时从砂中除去, 并把数据及时记录到《发芽试验原始记载表》中。在末次记数时, 有些检验员不将幼苗从培养盒中倒出就开始从盒中数数,这样不能对幼苗的根部做出正确判断, 且易出现漏数或重数, 导致结果不准确。应把每株幼苗分别拣出, 对其根系、胚轴、胚芽鞘、子叶等构造仔细辨别分析, 并按正常幼苗、不正常幼苗、新鲜不发芽种子、硬实和死种子分别记录到《发芽试验原始记录表》中。
