融合标签技术概述 融合标签技术的发展最初是为了简化蛋白质的纯化,即通 过重组蛋白质所含融合标签同固相介质中配体的特异相互作 用,实现重组蛋白质的亲和纯化陋哪“目。目前,随着多种融合标 签系统的研究和发展,融合标签技术也得到了更为广泛的应用, 包括重组蛋白质的纯化、目的蛋白质的检测和定向固定、体内生 物事件的可视化、提高重组蛋白质的产量、增强重组蛋白质的可 溶性及稳定性。融合标签的相对分子质量、来源、生理生化特性 各有不同陋191。亲和融合标签既可以是小分子多肽片段如多聚组 氨酸标签,也可以是整个功能蛋白质如麦芽糖结合蛋白(MBP)。 这些融合标签的作用机制包括了酶与底物、细菌受体与血清蛋 白、多聚组氨酸与金属离子、抗原与抗体等f1¨q。一些高表达的蛋 白质和分子伴侣如SUM0和NusA作为融合标签连接到目的蛋 白质上时,可以提高重组融合蛋白的表达量和可溶性,避免和减 少包涵体的产生,提高目标蛋白质的产量嗍。如果融合标签的作 用类型为抗原和抗体,此类融合标签也被称为表位标签(epitope tags)。由于抗体对抗原的识别和结合有很高的特异性,而表位标 签通常为小分子多肽片段,对重组融合蛋白的结构和功能影响 较小,可以结合免疫检测技术用于追踪和定位目的蛋白,进行蛋 白质及蛋白质复合体的结构功能相关性研究哪52.11。荧光蛋白如 绿色荧光蛋白(GYP)受激发时可以发出荧光,能够利用仪器定性 和定量检测。有利于对含有融合荧光蛋白标签的重组蛋白的表 达、追踪、定位及相关结构功能研究刚础l。
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