断乳前后乳猪消化道(胰、小肠内容物)发布网站:猪病专业网 www. 专业猪病防治与养殖技术网站 编辑:张强
● 关键词 断乳 猪 胰脏 淀粉酶 胰凝乳蛋白酶 胰蛋白酶 仔猪早期断乳是提高母猪的生产能力和规模化养猪业中的关键技术之一,但是早期断乳容易因消化能力较低而影响仔猪的生长发育。胃肠道的消化能力在猪的生长过程中起着极其重要的作用。但是,仔猪在3周前消化能力很有限,原因是消化道发育不成熟和消化酶分泌不足,只能靠母乳提供生长所需的营养物质。Bailezy 和Wood(1956)报道,仔猪消化淀粉的能力较差,21日龄前胰淀粉酶分泌很少,虽然乳糖酶的活性很高,但麦芽糖和蔗糖酶的活性很低。仔猪由母猪转变为含淀粉的日粮后,淀粉酶的活性提高,生长至8周龄淀粉酶的分泌量一直在增加。胰蛋白酶的活性在3周龄前较低,接近3周时迅速增大。根据乳猪消化道内各种消化酶活性的变化,合理配制早期断奶仔猪饲料将有利于仔猪的生长发育。 本试验的目的是研究乳猪断奶前后消化道中几种酶活性的变化,以确定合适的断奶周龄,为配合符合仔猪生理特点的日粮、加入外源酶强化仔猪料、提高饲料的消化率,改善仔猪生长速度提供理论根据。 1.材料和方法 1.1材料制备 随机抽取3、4、5、6、7周龄的乳猪各2只(公母各1只),集中屠宰。屠宰前允许其饮水、进食至少45分钟。样品采集制备依照Owskzy(1986)的方法稍经修改完成:开腹后立即结扎幽门瓣、回肓瓣、胰腺管,以防止样品相互污染;摘取胰脏,剥除脂肪组织和结缔组织;取含内容物的十二指肠一段,将其中的内容物刮出;样品放入液氮中速冻;加10倍体积预冷的乙酸酸化水(pH2.5)匀浆45秒;以27,000 × 4℃ 10分钟离心匀浆液,移出上清液,-70℃ 冻存备用。 1.2淀粉酶活性测定 依据Bernfeld 的方法进行,处理过程保持低温迅速完成。取对照试管和测试管各1只,加入制备的酶液1ml 及柠檬酸缓冲液(pH5.6)1ml 。在对照管内加入4 ml 0.4N NaOH溶液。两管在48℃水浴中保温15分钟后加入40℃预热的淀粉溶液2ml,摇匀,立即放入40℃水浴,准确保温5分钟后取出,向各测定管迅速加入4ml 0.4N NaOH以终止酶的活力。取其中溶液2ml,加入2ml 3.5?二硝基水杨酸试剂,混匀,置于沸水浴,准确煮沸5分钟,取出冷却,用蒸馏水稀释至25ml,在520nm分光光度计下比色。 1.3胰蛋白酶活性测定 依照Schwert的方法修改后完成,底物为胰蛋白酶特异的N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(BAEE,下同)。取2个石英比色杯(带盖,光程1ml),分别加入25℃ 预热2. 8ml BAEE-0.05M,pH8.0 Tris-HCl缓冲液(含CaCl2),在1比色杯中加入0.2ml 0 .05M pH8.0 Tris-HCl 缓冲液,混匀,作空白对照零点。在另一比色杯中加入0.2 制备的酶液,立即混匀并计时,在253nm 处测定光密度增加值,待增值趋平即停止。其中每30秒测定计录一次。根据时间?光密度曲线的直线部分,依以下修订公式计算: 1.4胰凝乳蛋白酶活性测定 依Hummel等(1959)的方法进行;底物为胰凝乳蛋白酶特异的N-乙酰-L-酪氨酸乙酯(ATEE,下同)。取2个石英比色杯,以一个色杯加0.05M pH7.0磷盐缓冲液调零,另一比色杯加2.80ml ATEE-0.05M pH7.0 磷酸盐缓冲液,0.20ml酶液,立刻混匀计时,于237nm处测定 О.D下降值,每30秒读数一次,持续3~5分钟。依修订公式及标准曲线计算 2 结果与分析 2.1胰脏淀粉酶活性的测定 胰脏淀粉酶活性的测定结果见表1。胰脏中淀粉酶的活性从21日龄到28日龄基本保持在500~600个酶活单位,上升的幅度不大。而从28日龄到35日龄时则有大幅度升高,从583.6个升高到1125.6个覆盖活单位,增加了近1倍。35日龄断乳后,42日龄的胰淀粉酶活性则又降至972.4个活性单位。这说明受断奶影响,淀粉酶活性有所下降。而49日龄的乳猪胰淀粉酶活性不仅恢复到35日龄水平,而且还略有增高,说明喂料刺激后,酶活性呈增加趋势。 2.2胰脏和小肠内容物胰糜蛋白酶活性 胰脏和小肠内容物胰糜蛋白酶活性见表2。胰脏中与小肠内容物中胰糜蛋白酶活性变化类似,但差异较大。自21日龄到35日龄活性增加,21日龄时胰脏匀浆的胰糜蛋白酶的活性是每克胰脏2750个单位,小肠内容物中的酶活性为每克小肠内容物 1000个单位。随着日龄的增加,到35日龄时两个部位的酶活性分别达到6700和2250 个活性单位。35日龄断乳后,胰脏和小肠内容物中的胰糜蛋白酶的活性急剧降低, 42日龄分别为4700,1325和49日龄分别为2550,1150个活性单位。 2.3胰蛋白酶在胰脏和小肠内容物中的酶活性变化 胰蛋白酶在胰脏和小肠内容物中 3.讨论 |
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