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哥伦比亚琼脂培养基在生物制药中的应用

 生物探索 2014-01-16

  品种名称: 哥伦比亚琼脂培养基

  英文名称:Columbia Agar Base

  品种编号:024061

  规格:250g干粉培养基

  培养基用途:用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》2010年版)。

  哥伦比亚琼脂培养基使用原理:

  酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、酵母浸出粉、可溶性淀粉提供碳氮源、维生素和生长因子;羊血是细菌生长繁殖的良好营养物质。在45~50℃的基础培养基中加入血液可以保存血液中某些不耐热的生长因子,同时血球不被破坏。庆大霉素能抑制肠杆菌科和铜绿假单胞菌的生长。

  微生物图鉴:

  哥伦比亚琼脂培养基配方(每升):

  酪蛋白胰酶消化物10.0g

  心胰酶消化物3.0g

  玉米淀粉1.0g

  肉胃酶消化物5.0g

  酵母浸出粉5.0g

  氯化钠5.0g

  琼脂15.0g

  最终pH7.3±0.2

  哥伦比亚琼脂培养基使用方法:

  1、称取本品44.0g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,在45~50℃,每100.0毫升培养基加入5.0~10.0ml无菌脱纤维羊血,可配成血琼脂;如检测梭菌,每100ml培养基基础加入配套试剂1支(SR0160)(33.3mg/L硫酸庆大霉素),均匀,倾注平板。

  2、接种菌株至平板上划线,35~37℃厌氧培养18~24小时;(药品)取培养物0.2ml涂抹于平板30~35℃厌氧培养48~72h。结果观察。

  质量控制:

  下列质控菌株接种至本培养中于35~37℃培养24h结果如下:(添加血)

  菌 名          菌 号    生长状况  培养特征

  单核细胞增生李斯特氏菌CMCC(B)54002  良好  窄小β溶血环

  金黄色葡萄球菌    ATCC6538    良好    β溶血环

  乙型溶血性链球菌  CMCC(B)32210   良好    β溶血环

  肺炎链球菌      CMCC(B)31001  良好    α溶血环

  下列质控菌株接种至本培养中于30~35℃培养48~72h结果如下:(添加庆大霉素)

  菌 名        菌 号    生长状况  培养特征

  产气荚膜梭菌  ATCC13124    良好    灰白色

  铜绿假单胞菌  CMCC(B)10104  抑制    --

  大肠埃希氏菌  CMCC(B)44102  抑制    --

  贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

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