整理:恰妮斯虫 来源:医学界检验频道 嘉宾介绍 杨启文 北京协和医院检验科主任助理 中国抗感染及临床微生物专家委员会成员
正式演说开始前,他表示分子诊断技术在病毒检测中已经相当成熟了,但是涉及真菌领域,还是开展得非常之少。然而,分子诊断技术在真菌检测中的利用价值以及是否真正能推广开成为常规的临床项目,实际上目前还处于探讨的阶段。 好了,闲话不多说,一起来看看这款神兵利器,究竟神还是不神呢? 微生物学证据 vs. 分子检测(核酸) 临床诊断:微生物学证据 镜检:痰、肺泡灌洗液、支气管毛刷、窦道析出物任一病灶能查见丝状菌 培养:肺泡灌洗液、支气管毛刷、窦道析出物任一病灶查见丝状菌 抗原检测:G试验(血浆、血清) GM试验(血浆、血清、BALF、CSF) 当出现以下情况则可以确诊: 镜检:无菌病灶处、病理切片查见真菌 培养:CSF、组织、无菌病灶引流液、血任一无菌病灶处培养阳性(BALF、颅窦标本、尿培养出真菌均不能确诊) 抗原检测:发现隐球菌抗原 杨教授表示:这些检测手段可能会和肿瘤或其他基因性疾病有交叉的临床表现,容易产生混淆。虽然分子检测也是从病原学的角度找病原,但病原的特异性核酸更容易被检测到。 四种分子检测(核酸)技术 1.非扩增的核酸检测技术 PNA FISH(Yeast Traffic light,AdvanDx) 2.核酸扩增检测技术(NAAT) Real-time PCR Multiplex PCR 3.直接基因测序 4.MALDI-TOF 质谱(peptides) 快去复习昨日推送的功课~此处以酵母菌为例子说明: 杨教授补充道:分子检测的潜在问题也不少。第一,不清楚检测出来的核酸究竟是活着的真菌体本身的还是死亡真菌体释放出来的;第二,无法判断是游离的核酸片段还是从孢子或菌丝中释放出的核酸;第三,检测出的核酸是否能成为标本真菌感染的证据仍待商榷。 也正因此,现阶段分子检测只能成为临床真菌诊断的有效辅助依据,但还不能作为确诊的证据。目前分子检测的方法学未标准化,所以尚未纳入侵袭性真菌感染的EORTC/MSG。 目前,商业化的分子检测产品可以提供标准化的方法和试剂,从而加速了分子检测的验证过程。
杨教授介绍说商品化的试剂盒比较简单、容易标准化,只是试剂的量不够大。当核酸足够多的时候,灵敏度是可以保证的,分子检测是真菌检测的一种快速、广谱的方法 。 分子检测在真菌分类学上也是一种很好的工具,而且对于生长缓慢、不长孢子的真菌,用基因测序方法都可以得到一个可观的结果。他表示尽管还存在不少弊端,仍希望能在未来看到此技术能在临床真菌检测中起到重要作用。 虫小编按:看到这里,神与不神,你的心里有答案了吗?还是和我一样有点晕乎乎呢?说不定在未来的某天,分子检测技术也能成为检验真菌的常规方法,就让咱们一起拭目以待吧! |
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