来源:衡道医学 阴性对照 阴性对照主要是为了排除阳性结果是否存在内源性生物素、内源性过氧化物酶和其他的非特异性着色。 在日常工作中最常见的是采用缓冲液替代一抗的方法。当抗体浓度过高、抗原修复过度、检测系统与一抗浓度不匹配等原因时,也会出现非特异性着色,因此,选择替代法阴性对照和用该抗体在正常浓度下不表达的组织(肝、肾组织存在很多的内源性生物素,有部分抗原修复过度或抗体浓度过高时,也会出现非特异性着色,可作为阴性对照组织的一种)做成阴性对照,与被检组织一起染色。 阳性对照 阳性对照又分自身对照和已知阳性组织对照。 自身对照是指被检组织内存在已知抗原的正常组织,自身对照结果阳性,说明本次实验操作过程是正确的,使用的抗体也是正确的,但不代表抗体稀释比是正确的,因为自身对照的组织都是正常组织,抗原表达很强,用很低的抗体浓度,就能有很好的表达,而肿瘤抗原通常表达都较弱,往往需要正常的稀释比才能正确表达,如果抗体浓度低,会出现假阴性的结果。 已知阳性组织对照是选择结果强阳性的肿瘤组织做阳性对照片,效果和自身阳性对照也是一样的。 |
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