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什么?不会做实验?circRNA芯片轻松搞定高分文章

 解螺旋 2020-08-27

作者:Dr. 饕餮

转载请注明:解螺旋·临床医生科研成长平台


近年来,非编码RNA调控成为的生物学研究,特别是疾病研究的热门领域。其中,环状RNA(circRNA)是一类近年来刚被鉴定出有重要的生物学功能的非编码RNA。环状RNA是指头尾相接成环状的RNA分子,其产生的方式十分多样。因为缺乏5‘和3’末端,circRNA相对于线性RNA更难以被降解,因此大量存在于细胞组织中。

尤其,近年来发现环状RNA在多种疾病中有特异的表达模式,并行使重要的生物学功能。其中,环状RNA在疾病中的表达研究是研究环状RNA功能的第一步,今天,就带大家来看看疾病中环状RNA研究的套路。

例子是一篇今年八月中国研究者发表在SCI REP上的文章:

从题目可以看出,是环状RNA在胃癌(gastric cancer)中的表达谱分析,全文基本都是分析,只有qPCR一个实验,让我来带大家仔细看看。(回复170910可下载,一周有效)

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首先,作者在5对成对的胃癌癌和癌旁组织中进行了环状RNA表达分析:

发现了一批高表达和低表达的环状RNA,并对应列出了产生环状RNA的基因(母基因):

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得到了表达之后,下一步当然是验证了,作者扩大样品量,在50对成对的临床样品中使用q-PCR验证了芯片结果,证实了芯片的可靠性:

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差异表达的环状RNA可能的功能是什么。不像非编码RNA有来自于基因间的,环状RNA基本都来自于基因座位,先看看差异表达的环状RNA的母基因的功能聚类,可能会有一些线索:

聚类结果显示环状RNA可能和生长素结合,黏附分子结合等相关。暗示了它们的潜在功能。

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接着,环状RNA的作用方式现在还不是十分明确,其中,报道比较多的是作为分子海绵吸附miRNA,因为它能长期稳定存在,所以这种吸附作用被认为更加稳定。于是,作者分析了差异表达环状RNA上的miRNA作用位点:

  进一步的,作者就三个差异最大的circRNA绘制了预测靶向miRNA的网络图,可以看到有很多交叉的miRNA,暗示靶向网络的复杂性:

就这样,一篇环状RNA在疾病中的表达研究就完成了,是不是很容易呢?所以,只要选择合适的疾病,加上有套路的实验设计,临床样品中环状RNA也是非常容易出文章的研究领域。

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近十年来,RNA相关疾病表达谱的研究经历了mRNA,miRNA到现在很多的lncRNA和circRNA阶段,相比于lncRNA来说,环状RNA研究开始的更加晚。很多疾病中的环状RNA表达情况都没有被报道,因为跟母基因相关,环状RNA从一定程度上可以预测功能,或者像文章作者那样基于miRNA预测也十分实用。

总之,疾病的环状RNA还是一片科研的处女地,而国内也有很多提供此服务的公司,推荐有临床样品的各位可以尝试。

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