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1980年Onder等首次报道了一例由EDTA-K2诱导的血小板聚集，粘附，引起血常规检查时血小板假性减少这一现象，这一研究结果受到国际广泛重视。EDTA依赖性假性血小板减少的发生机制尚不明确，在临床实验室实际检测中，血常规涂片检查尤其重要，必要时需要手工稀释法计数板计数，采用枸橼酸抗凝血做血常规检测，能有效避免EDTA-K2诱导的血小板减少。 日前，我们在门诊检验中，发现一例EDTA依赖性假性血小板减少病例。现对此病例做一回顾。 患者女，48岁，自述无发热等症状，全身无明显出血点，近日来我院口腔门诊就诊。血常规检查结果如下： 首先我们用迈瑞BC6900检测，结WBC 4.66*10^9/L，RBC 4.29*10^12/L，HGB 136g/L，PLT 11*10^9/L。MPV 11.1fl,PDW 16.2仪器报警显示血小板直方图异常、血小板聚集、血小板减少(详见图一)。 随后我们将患者患者EDTA-K2抗凝血标本在Sysmex XE－5000上进行复检，计数结果：WBC4.30*10^9/L，RBC 4.31*10^12/L，HGB 137g/L，PLT 14*10^9/L，MPV和PDW未出结果。仪器报警显示PLT Clumps？PLT Abn Dst、Thrombo-（详见图二）。 两台仪器计数保持很好的重复性，显示血小板计数低，血小板可能存在聚集，两台仪器的血小板直方图显示都存在拖尾现象，并且尾部翘起，可能有大血小板，或者红细胞碎片干扰，根据复检规则，需要推片镜检。用迈瑞自动推片机推片，瑞氏染液染色。染色玻片如图三，染色完成，推片头体尾可见，未见脂血涂片特有的空泡现象，排除脂血干扰。镜下可见血小板大量聚集（见图四，图五，图六，图七），特别是尾部，聚集明显。我们考虑是否EDTA依赖性假性血小板减少？ 我们与患者沟通，询问病史，患者自述最近一次测得的血小板100*10^9/L左右，获得家属理解，重新用枸橼酸抗凝管采血复检。在迈瑞BC6900检测结果WBC 5.20*10^9/L，RBC 3.88*10^12/L，HGB 124g/L，PLT 105*10^9/L，MPV 9.9fl,PDW 17.0（详见图八）。在Sysmex XE－5000检测结果WBC 5.03 0*10^9/L，RBC 3.92*10^12/L，HGB 125g/L，PLT 109*10^9/L,MPV10.7fl,PDW13.0（详见图九），现将两台仪器用不同抗凝剂所做结果做一比较（见表一）。
表一，两台仪器检测不同抗凝血结果比较
图一 BC6900 EDTA-K2抗凝血检测的数据和散点图
图二 Sysmex XE－5000 EDTA-K2抗凝血检测的数据和散点图
图三 瑞氏染色，左侧EDTA抗凝血涂片，右侧枸橼酸抗凝血涂片
图四 EDTA-K2抗凝血涂片，体尾交界处可见血小板聚集
图五 EDTA-K2抗凝血涂片，尾部易见血小板大量聚集
图六 EDTA-K2抗凝血涂片，尾部易见血小板大量聚集
图七 EDTA-K2抗凝血涂片，尾部易见血小板大量聚集 图八 BC6900枸橼酸抗凝血检测的数据和散点图 图九 Sysmex XE－5000枸橼酸抗凝血检测的数据和散点图 图十 枸橼酸抗凝血涂片，体尾交界处血小板分布正常
图十一 枸橼酸抗凝血涂片，体尾交界处未见血小板聚集 1993年，国际血液学标准化委员会（ICSH）推荐将EDTA-K2（乙二胺四乙酸）作为血常规检验的抗凝剂，EDTA依赖性血小板减少发生率大概千分之一，门急诊工作中还是应该关注到此种情况。血小板减少可能存在多种情况：采血不顺利，多次穿刺，绷带绑扎过久，抗凝剂未能混匀等人为因素；血液系统疾病包括特发性血小板减少性紫癜，再生障碍性贫血等；抗肿瘤药物导致的骨髓抑制造成血小板减少比较常见；一些严重感染病例，如脓毒症患者；肝脾功能亢进导致的大量血小板滞留脾脏；妊娠；免疫性疾病等。 本例患者，不管是EDTA抗凝血还是枸橼酸抗凝血经两台仪器比对复做，重复性都较好。此例患者EDTA抗凝血检测时，三系中只有血小板计数较低（表一），血小板直方图表现拖尾现象（图一，图二），后经离心观察未见血浆浑浊，未见脂血特征，涂片也排除脂血影响（图三）。细胞涂片检查可见体尾交界处有血小板聚集（图四），特别是尾部有大量血小板凝集（图五，六，七）。枸橼酸抗凝血在两台仪器复做血小板检测，仪器未报警（图八，图九），患者结果在参考范围内，枸橼酸抗凝血涂片未见血小板聚集现象（图十，图十一），且涂片镜下观察数量与仪器大致相符，与手工稀释法计数板计数结果保持一致，故采信枸橼酸抗凝血复做结果。此患者是一例典型的EDTA依赖性假性血小板减少病例。 EDTA依赖性假性血小板减少的发生机制目前尚不明确，有研究认为可能跟EDTA可以活化血小板，使其表面蛋白展示构象表位与自身抗体反应，最终出现血小板聚集。 当前，多数医院门急诊患者人满为患，血常规标本量较大，限于多数医院规定三十分钟出报告，我们既要按时出报告，又要保证数据质量可靠。本文旨在与临检血液体液组实验室工作的同事们就EDTA依赖性假性血小板减少做一交流，也提醒大家在审核报告时，心中有这样一个概念，以便在遇到此类患者标本时能及时采取纠正措施，防止发出错误报告。 参考文献 [1] Onder O, Weinstein A, Hoyer LW. Pseudothrombocytopenia caused by platelet agglutinins that are reactive in blood anticoagulated with chelating agents [J]. Blood,1980,56(2):177-182. [2] AkyolL,et al. Ethylenediaminetetraacetic acid-dependent pseudothrombocytopenia in a patient with systemic lupus erythematosus and lupus nephritis [J]. Eur J Rheumatol,2016, 3(1):36-37. [3] Salama A .Autoimmune Thrombocytopenia Complicated by EDTA- and/or Citrate-Dependent Pseudothrombocy [J].Transfus Med Hemother 2015 , 42(5):345-348. [4] Uslu AU, Inal S, Balta S.Assessment of Platelet-Lymphocyte Ratio Based on EDTA-Dependent Pseudothrombocytopenia [J]. Angiology, 2016 ,67(1):96-97. [5] Xiao Y, Yu S, Xu Y.The Prevalence and Biochemical Profiles of EDTA-Dependent Pseudothrombocytopenia in a Generally Healthy Population[J]. Acta Haematol, 2015,134(3):177-180. [6]宓庆梅,施巍宇,郝婉莹等.EDTA依赖性假性血小板减少症1例[J].中华检验医学杂志[J].2004,27(10):719. |
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