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5分钟看完13分的文章的逻辑性

 微笑如酒 2018-01-18
要看一篇蚊帐的逻辑性,主要看些什么呢?其实很简单,光是看看Fig. Lengend就差不多够了。可能几分钟就应该能知道这篇蚊帐是用什么样的方式来的。今天就来看一篇LncRNA对于STAT3蛋白磷酸化功能影响的蚊帐:



这篇蚊帐发表在Hepatology(IF=13.246),其实这篇蚊帐算是中规中矩的,除了展示了一下这个LncRNA对于STAT3的蛋白磷酸化,导致下游基因转录变化的过程,其他都算是按照套路出牌的。


这篇蚊帐一共8张图,Fig. Lengend分别是这样:


从上到下,我们可以看到这篇蚊帐完整的逻辑关系。首先要确认为什么要做这个LncRNA,肿瘤中有差异表达,而且低表达的患者死得快,这就是对这个LncRNA感兴趣的原因:


既然有表达差异,那表达差异后,是否对肿瘤的功能有影响?那就涉及到功能实验,在这里做了敲减和过表达的功能实验,增殖的,和迁移侵袭的:

当然,造成这种功能表型的原因又是什么?最简单的方法就是敲减和过表达这个LncRNA后,看下游基因的表达变化,做来做去也就是做个芯片,发现敲减LncRNA后,增殖和迁移侵袭的基因表达增加:


上面这些无论是细胞表型,还是下游基因的表达谱,我们都可以把它看作为LncRNA的表型实验。关键的机制,都是直接的相互作用,于是就做一个RNA Pulldown,很幸运,拉下来一个STAT3:


知道JAK/STAT信号通路的童鞋,都应该知道STAT3起到的是什么作用。同时表明STAT3的转录功能变化也和这个LncRNA有关。STAT3作为转录因子,和LncRNA结合影响了下游基因的表达,就能把之前的增殖和迁移侵袭的基因表达增加说通了。


由于是转录因子,而转录因子转录激活功能的变化,主要就和它的磷酸化激活有关,于是做了一下STAT3和这个LncRNA结合,对于STAT3两个位点的磷酸化影响,发现确实有变化:


接着引入了另一个蛋白TKT,这个蛋白被报道过和STAT3的磷酸化有关,结果发现这个LncRNA确实能影响两者的结合:


最后,将STAT3和TKT的磷酸化,又回归到临床上验证一下:


然后产生了这样的一张简单的模式图,其实用InkScape能画的比这个好看很多:

华丽丽的分割线

李莫愁博士:从Fig. Lengend里,我们不用特别仔细去看蚊帐的本身,也能理解整篇文献所表达的故事逻辑,这些思路也都是按照逻辑来一步步往下延伸的。你要问了,要是RNA Pulldown的时候,没拉下来STAT3的话怎么办呢?要是磷酸化位点没变化怎么办呢?要是不会影响TKT和STAT3的结合要怎么办呢?那可能就是另一个故事了,探索到的有价值的内容越多,蚊帐的意义就越大。




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