《Cell》如何更好的微调CRISPR？

在CRISPR基因编辑技术处于风口浪尖的时候，医学和细胞生物学界正在引发一场革命。尽管CRISPR应用前景广阔，但是CRISPR问世后一直争论不断，尤其是在伦理道德和技术精确度/副作用等问题上。

最近，Novo Nordisk基金会蛋白质研究中心的研究人员在《Cell》发表了一篇文章，称他们发现Cas12a可对基因编辑过程进行微调，从而取得预期效果。

如果我们把CRISPR比作汽车引擎，那么我们现在的工作就是绘制引擎的完整3D图，了解它是如何起作用的，Guillermo Montoya教授说道。新知识使我们得以对CRISPR引擎进行微调，使其以各种不同方式工作，比如F1赛车或越野车。

分子膜

研究人员使用哥本哈根大学建立的冷冻电镜技术绘制了CRISPR-Cas12a剪切DNA链时的不同形状快照。结合荧光显微镜技术，单分子荧光共振能量传递（FRET），直接观察分子运动和每个蛋白质序列所发生的事件。

除此之外，根据一系列快照，研究人员还发现，为了正确切割DNA，CRISPR工具的三个“片段”必须改变形式。

“我们的新研究揭示了基因组编辑过程中一系列精确事件，这三个碎片就像登机前的安保程序，你必须完成所有检查并按照正确的顺序才可以起飞，”Nikos Hatzakis副教授说。

他们的新发现可以解释，为什么CRISPR技术会对基因组产生副作用——

一旦DNA链被切断，三个“安检”碎片将持续开放。这可以让这个过程比预期持续的更久一点，因为基因编辑背后的机制继续运转，进而导致基因改变。

如今，研究人员希望，他们的新发现可以帮助改善这个问题。

原文检索：

Conformational Activation Promotes CRISPR-Cas12a Catalysis and Resetting of the Endonuclease Activity

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