|
一大早，看着小学妹坐在超净台前，两眼放空，我走上前关心：这是怎么了？学妹生无可恋地说：我的这个从隔壁借来的细胞怎么感觉和官方图片不一样呢，难道就因为不是我亲生的，就这么对待我吗，我还能按时回家过年吗？我跑到显微镜下看了一下，本应该像铺路石一样的HUVEC（人脐静脉内皮细胞）现在变得细长细长的。 这个问题long long ago就存在了。据说，现在我们使用的细胞株大约有15-20%或许已经不是亲生的细胞。很多杂志也认识到这个问题，要求待发表的文章进行细胞的身份鉴定。
那我们怎么鉴定细胞的身份呢？
这里就要应用到STR分析技术。短串联重复序列(STR)分析已经成为人类细胞系种内身份检测的标准。就像人类的亲子鉴定一样，每个等位基因以特定的频率出现在种群内，通过扩增足够数量的不同等位基因，乘以每个等位基因在此种群内的频率，就可获得一个细胞系的独特档案。近年来，大量研究表明STR基因分型方法是进行细胞交叉污染和性质鉴定的最有效和准确的方法之一，STR基因分型应用于细胞鉴定已被ATCC等机构强烈推荐。
STR细胞鉴定的重要性
曾经Hela细胞非常畅销，导致很多细胞被Hela细胞污染了，就好比，你做的是一个肠癌的课题，突然某天研究发现你这肠癌细胞里有HPV的E6/E7的表达，满心欢喜的你觉得自己有了个特别大的发现，发现HPV能导致肠癌。当你机智的发现是Hela细胞污染了你的肠癌细胞系之后，你又机智地换了个课题，前列腺癌的研究，突然又有一天，发现你的前列腺癌细胞中居然还有雌激素受体高表达……绝壁又是个国自然了！但是某天又发现，为什么这个前列腺癌细胞系里也有表达HPV呢？你说这样搞下去谁受得了？ STR鉴定方法？
有条件的实验室，在购买细胞的时候，需要问清楚是否提供STR 鉴定证书。
现在很多公司可以提供STR鉴定服务。实验室需要提供细胞的一般和特殊的生物学性状指标。一般特性指标包括：细胞的一般形态、特异性结构、细胞生长曲线和分裂指数、倍增时间、接种率、染色体分析、同工酶检查、DNA指纹图谱等。特异性指标常依据细胞种类和功能的特异性进行鉴定，比如，若为腺细胞则一般鉴定是否有特殊产物包括分泌蛋白或激素产生；若为肿瘤细胞，还应能够证明细胞确系来源于肿瘤组织而非其它，并仍保留有肿瘤组织的特性，为此常需做集落形成实验、裸鼠致瘤实验以及对正常组织的侵袭实验等。
那么当实验室中发生细胞系交叉污染时，我们该怎么处理呢？ 码了这么多字，是想告诉大家提高对细胞鉴定的重视。细胞培养体系在生物研究和药物研究发展中非常重要，随着研究的深入，细胞系的种类也逐渐增多，而细胞系的交叉污染仍然存在。交叉污染给实验研究带来了很严重的问题，如果使用了错误的细胞系使研究的结果遭到质疑，前期的实验可能都要重新来做。遵循这些最佳实践将有助于防止浪费时间和无效研究。 |
|
|
