1.设计两条sgRNA及带有Loxp位点的同源重组模板，利用基因编辑介导的同源重组，在靶基因特定外显子两侧的内含子中各敲入一段方向相同的LoxP序列，在Cre重组酶的作用下，两个LoxP位点间的靶基因被切除，起到条件敲除靶基因的作用。
服务项目及周期
1、靶点设计、载体构建、显微注射、首建鼠基因型鉴定
2、提供3只以上F1代小鼠
3、F0代鼠构建4-6个月，F1代小鼠6-8 个月
2.条件敲除同时兼具报告基因功能的小鼠、大鼠构建：利用基因编辑介导的同源重组在内含子中定点敲入反向的带有剪切接受子SA、绿色荧光蛋白GFP和转录终止信号polyA的片段，并在片段两侧插入两对交错排列的lox66和lox71序列。在Cre重组酶的作用下，插入片段被倒转为正向序列，使反向插入的DNA片段形成一个新的外显子，融合表达GFP报告基因同时终止内源基因的转录，起到敲除靶基因同时标记被敲除细胞的效果。
服务项目及周期
1、靶向目标序列的Guide RNA设计、重组同源臂设计构建、显微注射、 F0代鉴定
2、提供3只以上F1代小鼠
3、周期4-6个月 获得F1代杂合子小鼠后进行测序鉴定，提供不少于3只F1代杂合子小鼠。 |
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