定量PCR实验中为什么阴性对照也出现明显的起飞?

(1)mix 或水被污染。

(2) 引物二聚体的出现。 用 SG 法在 35cycles以后阴性出现起飞属正常情况,可配合熔解曲线进行分析。

(3) 反应过程中探针的降解。 用 PAGE 电泳对探针进行检测。

(4)如果使用了ROX校正,则可能是ROX的降解所造成。