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把各位仁兄给出的资料加以整理，现编辑如下，希望能在临床上给各位以指导应用 复合药的纸片法药敏试验 药敏纸片法是最常用的一种试验方法,能直接体现出抗菌药物的抗菌效用,其优点是：直观明显,对比鲜明，有一定的实验依据。缺点是：仅表现体外抗菌效果,由于抗菌药物在体内受体液环境,代谢分布,组织扩散浓度,半衰期等因素的影响,个别药物并不能真实反应出实际的抗菌疗效。下面介绍抗菌药物的药敏纸片法。 试验材料 经分离和鉴定后的纯培养菌株(例如大肠 杆菌、链球菌等),营养肉汤,琼脂平皿,棉拭子,镊子,酒精灯, 药敏纸片若干。 1药敏纸片的制作方法 1.1 选用质量较好的滤纸片(定量滤纸)，用打孔器打成直径为6毫米的圆片，每l00片放入一小瓶中，160℃干热灭菌1-2小时或高压灭菌后，在60℃条件下烘干备用。 抗菌药物浓度的配制 1.2 计算最小浓度值 按药物使用说明上的配料或饮水比例换算成一个基本单位药量(以能准确称量药品的最小值为宜，如0.5克、l克、2克等)，而需要配多少料或饮多少水，则相当于配制浸泡药片的药品浓度时所加蒸馏水的毫升数。例如，药品使用说明上标明5克本品可拌50千克饲料，其换算方法为l克本品可拌10千克饲料，也就是1克本品拌l0000克饲料，相当于药品浓度为l克本品加l0000毫升蒸馏水。 1.3 浓度配制 准确称取上述基本单位药量(片剂要研磨成粉末后再行称量)，在无菌条件下，按下列分列项用蒸馏水进行倍比稀释。根据以上换算l克本品加10000毫升蒸馏水，即l克本品加10×l0×10×l0毫升蒸馏水。如出现l克本品拌320克饲料等情况，可改成1克本品拌320克饲料，即加l0×4×8毫升蒸馏水。这样改动易形成分列项，并不影响实际效果。因为在配料时可按纸片浓度l克本品拌320克饲料进行拌料。如果所加蒸馏水量较少或现场蒸馏水充足，可不按上述倍比稀释法稀释，而直接按配料或饮水比例一次稀释而成。 1.4 药敏纸片的浸泡及保存 取l毫升已配制好的药液注入已灭菌的含l00片纸片的小瓶中，置冰箱内浸泡1-2小时后取出烘干，并置冰箱中保存备用(可保存6个月)。 2药敏试验的操作步骤 2.1 取自然发病动物的病料心血、脾、肝脏、淋巴结或病变明显的组织无菌操作接种鉴别培养基37℃分离培养24h，选典型菌落备用。 2.2 将病料中分离出的病原菌用密集划线法或涂布法接种至专用琼脂平板培养基上，均匀的粘贴各药敏纸片，并记录每种抗菌药物药敏纸片的位置。 2.3 37℃培养12～18h，取出观察结果。 3判定结果 3.1 量取各药敏纸片抑菌直径大小，并仔细观察抑菌圈 的清晰度,通常直径小于10mm的判为该抗菌药物为低度敏感,10～15mm之间为中度敏感，15～25mm为高度敏感，25mm以上为极度敏感。 3.2 抑菌圈边缘分界清晰，内部洁净透明,说明该抗菌药物作用迅速，多半为杀菌剂；边缘十分清晰，内部朦胧说明该抗菌药物可能是慢效抑菌剂或有耐药的产生，或分解较快维持抗菌时间短。 3.3 抑菌圈中分层次形成同心年轮样，说明可能是联合使用抗菌药物或该抗菌药物失效过快或细菌产生了耐药性。 3.4 抗菌中草药的判定不同于抗菌西药，通常纸片抑菌直径达10mm以上即为高度敏感。 |
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