分子生物学必备的软件 SnapGene Viewer是一款专业的质粒图谱绘制软件,可以用来绘制质粒图谱,并创建、浏览、注释以及分享DNA序列文件。这个软件有Windows、MacOS、以及Linux版本,最新的Windows版本是SnapGene Viewer 4.3.7。 SnapGene Viewer的主要功能: (一)可视化 1、创建一个DNA序列文件,要么输入一个序列,要么从GenBank中导入一个记录,或者打开一个以常见文件格式存储的注释序列; 2、使用可定制的序列、酶、特征、引物和历史视图浏览或打印DNA序列及其注释; 3、搜索匹配的DNA序列; 4、查看和编辑DNA序列及跟踪; (二)注释 1、自动注释公共特性,或者手动注释编码序列和其它特性。 2、设计、注释引物进行PCR、测序或者诱变。 3、确定的开放阅读框(ORF)。 (三)分享 1、将质粒结构导出为图像,或者导出注释后的DNA序列到GenBank格式。 2、使用普遍可访问的snapgene格式自由分享数据。 通常从GenBank网站:(https://www.ncbi.nlm./genbank/)下载基因和蛋白序列。 (一)获取DNA序列 打开GenBank网站,选择“Gene”,在输入框中输入基因名称,比如CSPP1,点击“Search”,界面如下。 跳转到如下搜索结果界面。 点击想要查看的基因,出现如下界面。 继续向下滑动界面,会出现转录本的图谱,如下图所示。 点击“GenBank”选项,会出现DNA序列,如下图所示。 点击“Send to”后面的三角按键,选着“File”,点击“Create File”,如下图所示。 会出现下载对话框,如下图所示。 编辑文件名称并且选择下载地址,点击“下载”,既可以下载DNA序列。 若想查看启动子序列,可以通过增长下图红框中的“Selected region”,点击“Update View”增长显示的序列,用上述方法下载增长的序列。 由于基因可能是正向的,也可能是反向的,查看启动子序列需要增长已显示序列两端的序列,即把上图前面红框中的数字变小,后面红框中的数字变大。 (二)获取RNA的编码序列 如上所述,打开基因信息界面,出现转录本的图谱后继续向下滑动界面,找到“NCBI Reference Sequences”介绍项,如下图所示。 点击想要查看的转录本的编号(如上图中的红框所示),会出现转录本的序列,如下图所示。 标成红色的是编码序列,红色序列前面的是5′UT序列,红色序列后面的是3′UTR和poly A序列。可以用已介绍的方法下载转录本的序列。 (三)获取蛋白序列 如上所述,找到“NCBI Reference Sequences”介绍项,点击想要查看的蛋白的编号,如下图中的红框所示。 会出现蛋白的序列,如下图所示。 可以用已介绍的方法下载蛋白序列。 获取蛋白序列的另一种方法是打开GenBank网站,选择“Protein”,在输入框中输入蛋白名称,比如CSPP1,点击“Search”,界面如下。 会出现如下界面。 点击想要查看的蛋白,例如“centrosome and spindle pole-associated protein 1 isoform 1 [Homo sapiens]”,会出现相应的蛋白序列,如下图所示。 虽然在Genbank网站能够看到基因和蛋白的序列,但是用SnapGene Viewer软件打开上述下载的文件能够更直观的看到各种信息。 上述下载的基因序列文件是Genbank DNA文件(后缀是gb),上述下载的蛋白序列文件是GenPept Protein文件(后缀是gp),如下图所示。 (一)查看DNA序列 用SnapGene Viewer软件打开DNA序列文件可以看到外显子和内含子的示意图,如下图所示。 点击左下角的“Sequence”,即可以查看DNA序列。 显示的DNA序列如下图所示。 SnapGene Viewer软件会显示DNA序列在相应染色体中的位置。 用SnapGene Viewer软件打开包括基因侧翼序列的文件,可以查看启动子序列,如下图所示。 (二)查看RNA编码序列 用SnapGene Viewer软件打开RNA编码序列文件,处出现RNA示意图,如下图所示。 把光标放在某一个外显子的图标上,会显示该外显子的起始位置和长度,如下图所示。 把光标放在蛋白的图标上,会显示蛋白编码序列的起始位置和长度,蛋白的长度和分子量,以及其它信息,如下图所示。 选中一段序列会在左上角显示该序列的起始位置及长度、GC含量,如下图所示 用这种方法可以查看3′UTR的长度,如下图所示。 有些mRNA的序列包括poly A序列,如下图红框所示。 打开下载的miRNA的序列,可以看到pre-miRNA和成熟miRNA的序列,下图绿色图标标出的是成熟miRNA的序列。 (三)添加图标和引物 可以使用SnapGene Viewer软件在序列中添加图标和引物。 选中需要添加图标的序列,点击上方的“Feature”,选择“Add Feature”,会出现如下对话框。 在对话框中输入名称,点击“misc_ feature”选择图标类型,点击“OK”,即完成添加图标。下图是添加“3′UTR”图标后的文件。 点击“Primers”,选择“Add Primer”会出现如下对话框。 在对话框中输入引物名称和引物序列,点击右下角的 “Add Primer to Template”,即完成添加引物。下图是添加引物后的文件。 选中两个反向相反的引物,会显示PCR产物的起始位置和长度,如下图所示。 (四)查看蛋白码序列 用SnapGene Viewer软件打开蛋白序列文件,会出现蛋白的结构示意图和基本信息,如下图所示。 点击左下角的“Sequence”,会显示蛋白的序列,如下图所示。 SnapGene Viewer软件还有很多功能,这里不一一介绍。 END |
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