 Trizol/Tripure Trizol/TriPure 试剂适用于从不同的生物样本(包括人类、动物、植物、酵母、细菌和病毒来源的样本) 中分离总 RNA 或同时分离RNA、DNA 和蛋白质。 试剂仪器准备 氯仿，异丙醇，75%乙醇（DEPC 水），无 RNase 水或 0.5%SDS, 12000g 高速离心机，聚丙烯离心管，水浴（55-60 度），*密度梯度离心试剂（用于白血细胞提取），*糖原（用于小于10mg 的组织样本） 匀浆裂解样品 根据样品类型的不同，按下表在室温下完成匀浆裂解操作；样品体积不能超过Tripure试剂的10％；同时，按建议体积量加入Tripure试剂，保证充分裂解，避免DNA污染。 对高脂肪、蛋白、多糖 、胞外基质的样品（例如肌肉，脂肪，块茎类植物等）， 需要额外步骤去除不溶性成份。（如果后续还要提取DNA，则省略该步骤） 在此，可以继续进行实验，或将匀浆样品在-80度保存（一月以上）。 溶液相分离 1、 匀浆样品在室温下放置5min，使核蛋白复合体充分分解。 2、每1ml Tripure匀浆液中加入0.2ml氯仿，盖紧离心管。 3、手动剧烈摇荡离心管15s。 4、室温下放置2-15min。 5、4度12000g 离心样品15min。 6、离心后匀浆液分层，最上层是无色的水相，RNA主要分布在其中，约占总体积的50%。 7、倾斜离心管45度，小心吸取上层水相至新的离心管，避免吸取其他各相液体。 8、如果要分离DNA和蛋白，保留剩余液体；有机相可以在4度过夜保存。 RNA沉淀 1、对小量提取的RNA（小于约10^6细胞，或10mg组织），添加入5-10ug 无RNase 的糖原作为共沉淀的载体。 2、每1ml Tripure匀浆样品，加入0.5ml异丙醇到离心管。 3、室温放置10min。 4、4度12000g 离心样品10min。  RNA清洗 1、轻轻吸取上清，加1ml 75%乙醇/1ml Tripure匀浆样品到离心管。 2、在此, RNA可以-20度保存一年以上。 3、稍微涡旋离心管，4度7500g 离心样品5min。 4、去上清，真空或敞口干燥RNA 5-10min；避免过分干燥。 RNA 重溶 1、加入20-25ul无RNase的水或0.5%SDS溶液重溶RNA沉淀。 2、枪头吹打溶液，之后放入55-60度水浴中10-15min。 3、-80度长期保存或进行后续实验。 RNA产量测定 测定A260nm数值，以公式 A260×稀释倍数×40= ug RNA/ml 计算RNA含量，以A260nm和A280nm比值确定RNA的纯度。 各种样品预期的RNA产量值 (A260/280 比值大于1.8)
常见问题
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温馨提示：Trizol提组织RNA，如有用干冰研磨，建议使用丁腈手套哦，相比乳胶材质，丁腈更耐磨，耐酸碱腐蚀。最重要的是多多注意，手套破了赶紧换新的，保护RNA也要保护自己。
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