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河豚毒素（TTX）作为豚毒鱼类体内含有的一种生物碱，是毒性很强的一种非蛋白生物毒素，是一种典型的选择性极高的快速可逆的钠离通道阻断剂，可阻止钠离子进入细胞从而影响细胞膜动作电位产生。 实验中TTX常被使用于阻断钠离子通道，为了研究TTX在抑制阻断神经递质的诱发释放的两种不同电流中是否存在差异，以及探求TTX的最低完全阻断的工作浓度，在汉斯出版社《生物物理学》期刊中，有学者分别采用不同浓度的TTX作用于原代小鼠大脑皮层神经元细胞，记录不同浓度TTX存在下的eIPSC与eEPSC。 取新生24小时内的野生型小鼠，将新生鼠消毒后放入超净工作台中，断头处死，分离出大脑皮层，放入提前预冷的HBS缓冲液中。将HBS缓冲液倒掉，加入1mL0.25%的胰酶，放入37℃培养箱中消化，倒计时12~13分钟，消化完成后将胰酶吸干净，加入3mLplating溶液，清洗三遍防止胰酶残留，加入2mLplating溶液轻轻吹打8~12次，将细胞吹散。接下来用70µm的细胞筛滤去组织块，加入一定体积的plating溶液定容(按一只老鼠种植12个孔的比例定容)，上下颠倒混匀后每个孔加入1mL细胞悬浮液。最后将细胞悬液滴于玻片上进行培养。培养的第一天换上无Ara-C培养基，在培养的第四天和第九天换上含4μM的Ara-C培养基，培养13~14天至细胞成熟后进行电生理实验记录。 本实验通过使用大脑皮层神经元细胞在不同浓度TTX存在的条件下进行电生理实验来验证，可以从最后的实验结果中发现，随着TTX浓度的增加，它对诱发的突触后电流的抑制作用逐步增强，呈现出一种浓度依赖性关系。将eIPSC组与eEPSC组相比较，eEPSC组的IC50明显大于eIPSC组，这意味着诱发的突触后兴奋性神经递质的释放会对TTX的浓度变化更为敏感。综上所述，河豚毒素对不同类型的突触后电流影响不同，且诱发的兴奋性突触后电流对河豚毒素浓度变化更敏感。 文章链接：https:///10.12677/BIPHY.2021.93007 |
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