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临床来电质疑CK-MB结果异常…… 曹圆圆-杭州市肿瘤医院 临床来电质疑检测结果  临床 检验科，你们的结果是不是有问题，XX病人的CK-MB，怎么反而比CK大的，就像是分子比分母都大了。 哦，是这个病人啊，结果我们复查过了，检验报告单下面的备注里也说明了，考虑还是患者病情的原因，建议进行CK-MB的质量检测。  检验科 CK的生理意义 肌酸激酶（CK）是由B、M两种不同亚基组成的二聚体，正常人组织中有CK-BB、CK-MB、CK-MM三种同功酶。 CK-BB主要存在于脑组织、胃肠道及子宫平滑肌中，脑组织中几乎全为CK-BB；CK-MB主要存在于心肌组织中；CK-MM主要存在于骨骼肌组织中，占98%以上。在正常人血清中几乎无CK-BB或含量极低。 实验室检测的CK指各肌酸激酶同工酶总活性。CK-MB对心肌有较高的持异性，特别在急性心肌梗塞(AMI)发作时会大量分泌到血液当中。CK-MB会在心肌梗塞发生后4～6小时上升，24小时达到最高点，3天内恢复正常。下图为心肌受损后，临床常规使用的心肌损伤酶标志物与时间的相关曲线。 CK的实验室检测原理 一般医学检验实验室对CK的检测有两种方法：免疫抑制酶活性检测法和质量检测法。 免疫抑制酶活性检测法：使用一种针对CK-M的单克隆抗体，可抑制标本中99%以上CK-M亚单位的活性，但不影响CK-B亚单位的活性，然后使用测定CK的方法来测定 CK-B活性。因为血清中CK-BB的含量极微，且CK-M和CK-B亚单位的活性一致，CK-B活性的测定结果乘以2即为CK-MB同工酶的活性。 质量检测法：分电泳法(灵敏度不高)、ELISA法(测定时间偏长)和酶免法(易自动化，但仪器要求较高)。  我们实验室常规对CK-MB检测，采用免疫抑制法，从检测原理可以看出，需要默认M亚基被免疫抑制剂灭活，且需标本CK-BB含量极低。如果患者因颅脑损伤等原因使CK-BB过血脑屏障，那么存在的B亚基就会使测得的结果成倍上升；如果因为某种情况M亚基未被灭活，则保持活性的M亚基也可以使测得的数值明显偏高。所以，在这里列举一下因患者疾病原因，标本CK-MB测得值异常偏高可能的情况。  一、CK-BB存在 脑组织、胃肠道及子宫平滑肌坏死可使血清中的CK-BB升高，而导致采用免疫抑制法的检测结果偏高。这一部分患者，神经外科的医生已经见多不怪了，往往会结合病症，与其他心肌酶谱配合着分析。 二、巨CK的存在 巨分子酶因分子量大，在体内不易排出也较难被巨噬细胞吞噬、降解，所以有较长的半衰期，在常规生化检测中往往易引起酶活性假性升高及同工酶的改变。而免疫抑制过程中，抗CK-M亚基抗体因空间构象等因素，难以抑制巨CK-M亚基活性，导致测得值假性升高。 （1）巨CK1 巨CK1是CK同工酶与免疫球蛋白聚合的复合物，多为CK-BB与IgG或IgA形成的复合物，也有少数为CK-MM与IgG或IgA形成的复合物，偶见IgM型。巨CK1可见于自身免疫疾病，如干燥综合征、继发性肌炎、萎缩性肌炎等，但在少数健康人中也可检出巨CK1。 （2）巨CK2 巨CK2是一种低聚的线粒体CK，又称CK-Mt（Mitochonria，CK-Mt），存在于细胞线粒体膜上。当线粒体崩解时，线粒体膜的小碎片进入血液，CK-Mt呈寡聚状态。CK-Mt的抗原性和CK-M亚基不同，因此抗M亚基抗体无法抑制CK-Mt。巨CK2可见于恶性肿瘤、成人肝病（如肝硬化）及儿童心肌病等。 三、溶血严重 红细胞中不含CK及CK-MB，但红细胞中含有的腺苷酸激酶（ADK）却能直接参与CK的第二步反应，使得NADP+还原为NADPH，引起假性升高。虽然试剂盒中有5-磷酸二腺苷来抑制ADK，但抑制率一般在90%~95%左右，部分溶血严重的标本因这未被抑制的5%，而引起较大数值的误判。 CK-MB异常处理 这里讲的CK-MB异常，指的是CK-MB的测得值高于总CK的测得值。如果仪器的各项运行是没有问题的，就要从检测原理出发去解决这个问题了。 1 不同方法学复查 荧光酶免疫法（FELA）或化学发光免疫法（CLIA）等质量测定方法对CK-MB进行定量检测。 此类方法学能避免因CK-BB、巨CK等的干扰，特异性大大提高，同时灵敏度也优于酶活性法。 2 同工酶分析 一般采用免疫电泳法对CK进行同工酶分析，采用免疫电泳时，由负极向正极依次出现的条带为：巨CK2条带、CK-MM条带、巨CK1条带、CK-MB条带和CK-BB条带。 3 热失活法 将可疑标本放置于45℃环境，水浴20分钟，CK-BB和CK-MB活性基本失活，而CK不受影响。此法可以简便的判断与分析。 案例心得 天下武功，唯快不破。作为一名检验人，当然需要从检测的方法学上掌握检测的原理和过程，对于可能存在引起实验结果异常或错误的情况了然于心。CK-MB作为心肌损伤的检测指标，结合肌红蛋白、肌钙蛋白等心肌酶谱对急性心肌梗死（AMI）的临床诊断，价值巨大。 酶活性检测CK-MB的过程中，有对M亚基的灭活，测得的是B亚基活性，在计算过程中人为的乘以2。所以，某种情况M亚基未被灭活或因颅脑损伤等一些病理疾病而使得B亚基增高，就会导致测得值高于真实值的情况，在检验后的质量控制中，应该警惕。 对于复查后的异常报告，需进行备注，必要时与临床沟通，建议更改检测方法或结合其他指标进行判断。 整理：王乐见-浙江中医药大学附属第二医院 倪修文-浙江省嘉兴市中心血站 干国芳-浙江省湖州市妇幼保健院 编辑：赵家立-浙江省诸暨市人民医院 王 洁-浙江省杭州市儿童医院 潘连连-浙江省三门县人民医院 排版：赵家立-浙江省诸暨市人民医院 审核：费鲜明-浙江省人民医院 杭州医学院附属人民医院 |
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