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由白斑病毒（WSSV）引起的白斑病（WSD），是虾行业面临的最大威胁之一。白斑病可以导致比高死亡率，在几天的时间里，虾的死亡率可以达到100%。1992年，台湾首次报道了WSSV。从那时起，在日本、韩国、东南亚、南亚、地中海、中东、美国和澳大利亚都报告发现了白斑病毒。 无论虾是活的，还是冷冻的出口形式，包括:去头虾(HO)、生虾(HOSO)、去头虾(HLSO)或煮熟的虾产品。但，由于虾病有通过产品传播白斑病毒的风险，一些国家：包括澳大利亚、沙特阿拉伯、美国等国家，都对进口虾和虾原料实施了严格的规定，常用PCR法检测白斑病毒。通常情况下，如果结果是阳性，虾将被销毁或退会。并且，在我国越来越重视食品安全的情况之下，如果发现养殖户销售感染白斑病毒的虾，可能面临罚款等处罚。 已经发表的研究表明，冷冻虾最早发现WSSV是在1995年出口至美国的虾上，但很少有研究表明煮熟的虾，是否会有传播WSSV的风险。然而，这些研究大多基于WSSV病毒的PCR检测，并没有确定煮熟的虾是否含有受感染的DNA序列。 因此，亚利桑那大学水产养殖病理学实验室的研究人员，进行了一项关于这个问题的研究，以评估虾在煮熟时，是否会有感染WSSV的可能性。 1、本研究在患有WSSV病毒的养虾场获取虾样品，总共采用了2500尾南美白对虾，平均重量为10克，这是患病虾在池塘比较常见的规格。 2、将获取的虾样品，放置到实验室的池子当中，盐度保持25ppt，温度25摄氏度，投喂（WSSV病毒与饲料混合的）饲料。在实验当中，观察每小时的死亡率，当虾的死亡率达到50%时，就会停止实验。 图1：实验设计 3、把被感染WSSV的虾分为6组，每组40尾，投放到煮开的热水当中。每组规定的沸点时间依次为0、1、3、5、10和30分钟。然后把煮好的虾在零下20度，冷冻14天。并且在煮熟后，收集组织样本进行组织学和PCR检测。 图2：本研究采用的实验设计示意图，包括在不同沸点(0、1、3、5、10、30分钟)处理被WSSV感染虾，然后进行现场实验或将样品存放在冰箱，以便进行组织和PCP检测。 4、然后，为了确定煮熟的虾是否会传播白斑病毒，进行了另一项试验：在多个个实验箱注入不超过90升的水，每个试验箱放100尾健康的南美白对虾，再将煮熟的患病虾切碎和饲料混合，给健康虾喂食。该试验的时间为12天，每天的死亡率被记录下来，计算最终存活率。最后，从每个实验箱中取虾样品，并在95%的乙醇中保存，以进行PCR分析和组织检查。 1、研究表明，煮熟的虾（沸点为0分钟、1分钟）虽然被冷冻两周（14天），仍然可以用作一种传播白斑病毒的手段。典型的组织学表现是，当虾感染白斑病毒时，细胞核肥大。 图3：所有检测呈WSSV阳性的样品 图3A：当虾被煮水沸腾1分钟后，检测出WSSV； 图3B：当虾被煮水沸腾0分钟后，检测出WSSV； 图3C：当虾被煮水沸腾1分钟后，被冷冻14天，检测出WSSV； 图3D：当虾被煮水沸腾0分钟后，被冷冻14天，检测出WSSV； 2、本研究的结果表明，被感染的WSSV虾在沸点出现（1分钟以上-3分钟），不会再携带WSSV。数据显示，在所有虾样品在不同沸点时间的样本中，DNA WSSV受到了相当大的影响，质量和数量都低于煮熟前。PCR的结果表明，这种DNA已经变质，不再具有传染性。 3、在随后的实验中，健康虾被喂食受WSSV感染的虾组织，在一段时间内没有发现任何损伤。这一结果表明，煮熟的虾可以减少WSSV传播途径。并且，不仅是WSSV，还可能包括许多细菌、病毒或真菌。 图4：感染WSSV病毒的虾，qPCR结果汇总表 这个研究表明，在煮虾时，沸点在一分钟以上，可以隔绝WSSV的任何传播途径，这样无论是出口或进口，采取任何检测手段，都检测不出WSSV的存在。 |
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