草莓离体快速繁殖方法与流程

本发明涉及植物的快速繁殖方法，具体涉及草莓的离体快速繁殖方法。

背景技术：

草莓属多年生草本，果肉多汁，含有特殊的浓郁水果芳香。富含氨基酸、果糖、蔗糖、葡萄糖、柠檬酸、苹果酸、果胶、胡萝卜素、维生素b1、b2、烟酸及矿物质钙、镁、磷、钾、铁等，这些营养素对生长发育有很好的促进作用。中医认为，草莓性味甘、凉，入脾、胃、肺经，有润肺生津，健脾和胃，利尿消肿，解热祛暑之功。草莓中丰富的维生素c除了可以预防坏血病以外，对动脉硬化、冠心病、高血压、高血脂等，都有积极的预防作用。草莓中含有的果胶及纤维素，可促进胃肠蠕动，改善便秘。草莓中含有的胺类物质，对白血病，再生障碍性贫血有一定疗效。

目前国内市场上，草莓在浆果需求中已跃为第二。巨大的市场面对的是草莓种苗的供不应求。在生产应用中都是通过扦插育苗进行繁殖的。但是，长期的扦插繁殖不仅导致植物活力的减弱和病毒的增加，而且严重影响草莓对逆境的抵抗能力及质量，且制约了草莓的育种进程。所以迫切需要找到草莓种苗的快速繁殖方法。

技术实现要素：

本发明所要解决的技术问题为：提供一种草莓加快速繁殖方法，进行规模化生产以及以草莓组培为基础的其他学科的研究工作的需要。

本发明提供的一种草莓离体快速繁殖方法，包括以下步骤：

a外殖体消毒：选取生长旺盛的叶片，消毒漂洗后，用无菌水冲洗4～6遍，最后用无菌滤纸吸干表面水分，再在叶片上打孔；

b叶片诱导：将叶片上打孔下的小圆片接种到以下培养基中：ms基本培养基，蔗糖30g/l，植物生长激素，适当ph值下进行光照培养；

c再生芽培养：将培养20天左右的叶片上再生出的芽用剪刀剪下，接种到以下培养基中：ms基本培养基，蔗糖30g/l，植物生长激素，适当ph值下进行光照培养；

d生根培养：将生长至4cm左右的再生芽剪下，放到生根培养基进行生根培养：1/2ms基本培养基，适当ph值下，进行光照培养28天；

e炼苗移栽：将组培瓶盖打开，并添加一定量蒸馏水进行有菌条件驯化一段时间；用镊子将组培苗从瓶中取出，移栽到已经灭菌的栽培基质中，进行遮阴驯化2周，期间不定期的喷施1/2ms营养液。

作为本发明进一步优化方案，步骤a中的消毒漂洗方式为：流水冲洗20min后，再在超净工作台上用75％的酒精漂洗30s，无菌水清洗4遍后，用含0.1％升汞灭菌50～60min。

作为本发明进一步优化方案，步骤b中所述的培养基中涉及的植物生长激素，包括tdz（2.0mg/l），iba（0.15mg/l）。

作为本发明进一步优化方案，步骤b、c、d中草莓快速繁殖所述的培养条件为：光照周期12h/d，光照强度1600lux，培养温度25℃。

作为本发明进一步优化方案，步骤b、c、d中所涉及到的ph值范围为6.8～7.0。

作为本发明进一步优化方案，步骤e中添加蒸馏水10ml，进行有菌驯化2-3天。

作为本发明进一步优化方案，步骤c中所涉及到的植物生长激素包括iaa（0.2mg/l）。

本发明的有益效果：本发明采用离体培养的方法繁殖草莓，不仅可以摆脱外界条件的影响，四季都能进行生产，而且可以节约育苗占地，降低生产成本，并且保存了母体的全部优良性状，遗传稳定。这种方法保留了草莓的植株活性，可在短期内形成大量优良试管苗，缩短生长周期，适宜规模化、工厂化生产。

具体实施方式

本发明提供的一种草莓离体快速繁殖方法，具体包括以下步骤：

1.外殖体消毒：选取生长旺盛的叶片，流水冲洗20min后，再在超净工作台上用75％的酒精漂洗30s，无菌水清洗4遍后，用含0.1％升汞灭菌50～60min消毒漂洗后，用无菌水冲洗4～6遍，最后用无菌滤纸吸干表面水分，再在叶片上打孔；

2.叶片诱导：将叶片上打孔下的小圆片接种到以下培养基中：ms基本培养基，蔗糖30g/l，植物生长激素tdz（2.0mg/l），iba（0.15mg/l），ph值6.8～7.0下进行光照培养，光照周期12h/d，光照强度1600lux，培养温度25℃，诱导率达到90％，平均每个叶片诱导出再生芽5个；

3.再生芽培养：将培养20天左右的叶片上再生出的芽用剪刀剪下，接种到以下培养基中进行再生芽的培养：ms基本培养基，蔗糖30g/l，植物生长激素iaa（0.2mg/l），适当ph值6.8～7.0下进行光照培养，光照周期12h/d，光照强度1600lux，培养温度25℃；

4.生根培养：将生长至4cm左右的再生芽剪下，放到生根培养基1/2ms进行生根培养：ph值6.8～7.0下，进行光照培养28天，光照周期12h/d，光照强度1600lux，培养温度25℃，生根率达100％，平均根数目达11根；

5.炼苗移栽：将组培瓶盖打开，并添加蒸馏水10ml进行有菌条件驯化2～3天时间；用镊子将组培苗从瓶中取出，移栽到已经灭菌的栽培基质(木片∶珍珠岩∶园土＝1∶1∶2)中，放置无加温加光的温室中，进行遮阴驯化2周，期间不定期的喷施1/2ms营养液，移栽后成活率达92％。

技术特征：

技术总结
本发明提供一种草莓快速繁殖方法，进行规模化生产和繁殖以满足市场需要。草莓组织培养步骤包括：A.外殖体消毒，B.叶片诱导，C.再生芽培养，D.生根培养，E炼苗移栽。采用植物组织培养的方法繁殖草莓，不仅不受外界条件的影响，四季皆可进行，节约苗木占地，降低生产成本，而且可以保存母体的全部优良性状，遗传性状稳定。这种方法可在短时间内形成大量的优良试管苗，进行规模化、工厂化生产。

技术研发人员：张靓
受保护的技术使用者：江苏华夏知识产权服务有限公司
技术研发日：2017.09.21
技术公布日：2019.03.29