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VhH 抗体的优势： 重组 VhH 抗体，也称为纳米抗体，是由超免疫骆驼产生的天然存在的仅重链抗体 (HCAb) 的抗原结合片段（VhH 结构域，红色）。它们可以设计成单体或多聚体、多特异性形式，具有高靶标特异性、纳摩尔亲和力和低聚集倾向。它们也不太容易出现可能挑战传统抗体的空间位阻问题，这使得重组 VhH 抗体非常适合一系列临床前诊断和治疗应用。 重组 VhH 抗体的生产通常需要 8 个月的时间，包括抗原制备、骆驼免疫、文库构建、生物淘选和克隆分离、克隆验证和 VhH 抗体生产。 1.抗原制备 第 1 个月之前 Rockland使用一系列大分子作为抗原——只要它们可以在 BSL-2 条件下使用——例如蛋白质、重组或纯化的、合成肽、修饰肽、h aptens、全细胞裂解物、核酸酸、脂质和碳水化合物复合物 2.骆驼免疫 第 1-2 个月 Rockland使用指定的免疫计划和标准或定制佐剂在美洲驼和羊驼中产生 VhH 抗体。根据Rockland对抗体介导的免疫反应（抗血清滴定）的监测，可以在文库构建之前提供建议。 3.VhH 图书馆建设 第 3 个月 在确认满意的免疫反应后，Rockland生成了一个酵母展示库，代表了自然循环的抗原结合 VhH 抗体的完整库。为了确保可以在库中找到所需的绑定属性，Rockland分析了大小和多样性等关键参数。 4.生物淘选和克隆分离 第 4-5 个月 为了分离与感兴趣的抗原结合的克隆，我们使用了我们在数十年的成功项目中开发的专有亲和选择技术。 5.重组 VhH 抗体验证 第 6-7 个月 使用适合目的研究验证分离的单克隆，包括在与感兴趣的应用相关的条件下表征特异性（与预期目标结合）和交叉反应性（与无关抗原结合）。Rockland还可以对亲和力测定、抗体对鉴定等进行进一步的定制验证。 6.重组 VhH 抗体生产 第 8 个月 验证后，克隆以所需规模在细菌系统中表达，然后以适合结合和功能研究的水平纯化。 Rockland还可以在真核系统中表达重组 VhH 抗体，用于定制抗体格式和/或应用，并在需要时使用定制信号序列或 N 端或 C 端标签。 使用Rockland重组 VhH 抗体： Rockland的重组 VhH 抗体可以很容易地设计成多特异性和多价形式，以及与效应域（即 Fc）、酶等的基因融合。
图：结合 EGFR 阳性 A431 细胞或 EGFR 阴性 HEK293T 细胞的重组 EGFR x DIG 双特异性抗体（BsAb44 和 BsAb45）的流式细胞术分析。在与生物素化的 DIG 孵育或直接使用荧光偶联的抗 His 抗体孵育后，用荧光偶联的链霉亲和素检测 BsAb。 |
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