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目前，免疫比浊法在临床检验中较为常见，广泛应用于包括自身免疫病实验诊断、血脂分析、炎症监测、营养状态评估等在内的多种指标的化验分析。 从检测原理上来看，免疫比浊法可以分为透射比浊法、散射比浊法及免疫胶乳比浊法。 1．透射比浊法 血清中抗原成份/抗体与相应抗体/抗原相结合，形成不溶性抗原抗体复合物，使反应体系形成混浊。浊度高低反映血清样品中成份的含量，后者可由校准血清在一定波长下所作剂量-反应曲线计算出。 2．散射比浊法 血清中抗原成份/抗体与相应抗体/抗原相结合，形成不溶性抗原抗体复合物颗粒。特定光线通过产物悬液，会在各个方向散射。向前散射光通过光学透镜系统聚集在检测系统时，散射光强度与免疫复合物形成量成正比。通过将未知标本的“信号”与一系列标本或标准品相比，即可确定抗原成份/抗体量。 3．免疫胶乳比浊法 将待测物质相对应的抗体包被在直径为15-60nm的胶乳颗粒上，使抗原抗体结合物的体积增大，光通过之后，透射光和散射光的强度变化更为显著，从而提高试验的敏感性。
随着临床诊疗水平的提高，精准治疗已成为趋势，迎合这种需要，我们检验方面也应该实现精准检验。为此，排除干扰，保证检验结果的准确性，也是免疫比浊法应当解决的问题。 那么，通常情况下，从方法学角度来看，免疫比浊法会有哪些影响因素呢？具体而言，其影响因素主要包括以下几点。 1．伪浊度影响 伪浊度会会导致检测结果偏高。其原因有以下几点。 1）抗血清存在非特异性的交叉反应，导致非特异性抗原抗体复合物形成。 2）增浊剂浓度和反应时间掌握不当。此点实验室工作人员往往难以把握，往往是厂家在寻找原因时发现的。 3）样品本身的浊度如脂血、黄疸、溶血或药物性原因等处理不当。 4）试剂的污染和变质。尽管管控严格，但终有百密一疏，误用过期试剂现象还是存在的。 5）器械尤其是比色杯等不够清洁等。按照质控管理要求，设备定期的较准以及方法、项目的性能验证还是需要坚持进行的。
2．非特异性光散射 因标本组分中内源性光散射造成检测结果偏差。根据实验要求，透射比浊法需保证标本组分在3%以下，散射比浊法需保证标本组分在0.5%以下。 3．钩状效应 因抗原抗体比例不当，可导致检测结果假阴性或显著降低。其中抗体过量叫做前带效应；抗原过量叫做后带效应。目前，部分设备设计有自动检查钩状效应的功能，一旦发现，会自动进行稀释处理，而后再进行测试。 4．校正与质量控制 剂量-反应曲线对于结果的判断极为关键，曲线形状取决于抗血清和聚合剂浓度的选择，也与所用免疫浊度方法类型、校正方法及校正材料的质量有关。故选用合适的校正材料制作剂量-反应曲线非常重要。 精准检验，精准治疗，相辅相成，携手共进！ 参考文献： 临床检验质量管理，第1版，郑州大学出版社。  End◥ 来源 | 德安实验诊断 |
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