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BOSTER IHC实验操作视频 Experimental operation video 取材固定→切片→脱蜡至水→灭活→抗原修复→封闭→一抗孵育→二抗孵育→显色→复染→封片  / IHC实验操作视频/ BOSTER IHC实验产品清单 List of experimental products
注：点击产品货号查看产品详情 BOSTER IHC实验操作步骤 Experimental operation steps 第一步：切片 1.石蜡切片厚度5微米； 2.40℃水温展平组织后防脱玻片捞片； 3.60℃烘箱，烤片30min。 注意事项： 对于骨或皮肤这些易脱片的组织，可适当延长烤片时间。 第二步：脱蜡至水 1.二甲苯脱蜡，3缸，每缸10min； 2.100%、85%、70%酒精，各浸泡10min。 注意事项： 具体时间需根据室温和二甲苯的新旧程度灵活调整，室温越高，二甲苯越新，相应浸泡时间越短，以组织上无点状石蜡残留为准。 第三步：灭活 1.滴加内源性过氧化物酶阻断液； 2.室温孵育10min； 3.PBS缓冲液水洗3次，每次5min。 注意事项： 对于内源性过氧化物酶含量高的组织，可以适当延长孵育时间或增加过氧化氢浓度。 第四步：抗原修复 EDTA微波热修复5~8min，冷却至室温。 注意事项： 对大部分蛋白来说，EDTA修复液一般都能得到满意的结果。也可使用传统的柠檬酸盐修复液。样本固定时间过久或阳性表达不强，可以适当增加修复的次数和强度。 第五步：封闭 1.免疫组化笔画圈，防止试剂流出； 2.滴加5%BSA或者封闭血清； 3.37℃孵育30min。 第六步：孵育一抗 1.甩去多余液体，不洗，直接滴加一抗； 2.37℃孵育1-2h； 3.PBS缓冲液清洗3遍，每次5min。 注意事项： 初次实验，建议一抗做浓度梯度，以确定最佳的一抗稀释比例。 第七步：孵育二抗 1.滴加HRP标记羊抗兔； 2.37℃孵育30min； 3.PBS缓冲液清洗3遍，每次5min。 注意事项： 根据一抗种属决定二抗的类型，比如一抗为兔抗，那二抗选择HRP标记的羊抗兔IgG。 第八步：显色 1.配置DAB，1ml B液 1滴A液，混匀； 2.滴加DAB显色液； 3.镜下观察，控制显色时间； 4.终止反应； 5.水洗。 第九步：苏木素复染 1.苏木素复染40s； 2.蒸馏水水洗； 3.返蓝液浸泡1min； 4.水洗。 第十步：封片 1.70%、85%、100%酒精梯度脱水，每缸3min； 2.二甲苯透明，三缸，每缸3min； 3.晾干后，中性树胶封片，观察实验结果及拍照。 BOSTER IHC实验常见问题 Frequently Asked Questions 1.无染色
2.高背景
3.非特异性染色
BOSTER 博士德IHC实验图 Appreciation of Experimental Legends  a-SMA 人肺癌  BAX 人肝癌  BCL-2 人淋巴瘤  CD8 人乳腺癌  CD41 小鼠肺  CD163 人肺癌  COL2A1大鼠膝关节  COL2A1小鼠膝关节  COL3A1 人肺癌  GFAP 大鼠脑 GFAP 小鼠脑 GFAP 小鼠海马 PCNA 人乳腺癌 TH 小鼠脑 Vimentin 人肺癌 E-cadherin人肺癌 E-cadherin人乳腺癌 IBA1 小鼠脑 BOSTER |
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