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1、植物组织培养的基本原理是：植物细胞具有全能性 2、基因工程中，目的基因应该插入质粒的启动子和终止子之间 3、cDNA的合成方向为：5’→3’ 4、DNA子链的延伸方向为：5’→3’ 5、DNA分子复制n次，产生等长的目的基因片段的数量为：2n-2n 6、RT—PCR可提高某些微量RNA病毒的检测灵敏度原因是：增加了待测RNA逆转录产生的DNA的数量，便于检测 7、RT—PCR是从mRNA获得cDNA并进行扩增的一种技术，该过程中所需要的酶有：逆转录酶和耐高温的DNA聚合酶 8、利用特异性探针进行核酸检测的原理是：分子杂交 9、与体内DNA复制相比，PCR时不需要解旋酶 10、利用PCR技术扩增目的基因的前提是：要有一段已知目的基因的核苷酸序列 11、PCR反应中复性是指：两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合 12、一个DNA分子复制n次，则需需要在缓冲液中，至少加入2n+1-2个引物 13、PCR的过程是目的基因DNA受热变性后，解为单链。引物与单链相应互补序列结合，然后以单链DNA为模板在耐高温的DNA聚合酶作用下进行延伸，将四种脱氧核苷酸加到引物的3’端，如此重复循环多次 14、PCR的结果是使目的基因的序列成指数扩增，其原因是：一个循环得到的产物，可以作为下一个循环的模板，以及DNA半保留复制特点 15、PCR技术可以用于：获取目的基因，目的基因的检测 16、PCR技术具有操作快速、简便、对样本要求低等特点，它能与多种分子生物学技术配合使用。临床医学上PCR技术在遗传病诊断、发病机理的研究等方面发挥重要作用 17、由单一个体繁殖所获得的微生物群体，称为纯培养物 18、采集的土壤样本先用无菌水稀释，随后将样液置于培养基中进行摇床培养，目的是：增加培养液中氧气浓度，利于培养基与菌体充分接触，快速增加菌的浓度 19、测定筛选到的不同菌种的拮抗效果时，应先在平板的中央位置，接种所需拮抗的菌种。培养一天后，再在距离原菌落2cm处接种拮抗菌，并置于恒温培养箱中培养。一段时间后，通过比较抑菌圈直径与菌落直径的比值，从而判断菌株的拮抗能力 20、扩大培养工程菌时，应将工程菌接种于液体培养集中，这样做的优势是：有利于微生物充分接触，并吸收营养物质 21、T-DNA的作用是：将目的基因导入受体细胞，并整合到受体细胞的染色体DNA上 22、通常酵母菌培养基比细菌培养基有更高的碳氮比 23、细菌的生长速率一般比酵母菌快，但通常情况下酵母菌菌落比细菌菌落大 24、血细胞计数板常用于相对较大的酵母菌细胞，霉菌孢子等的计数，而用细菌计数板可对细菌等较小的细胞进行观察和计数 25、用光学显微镜观察酵母菌时，不能观察到核糖体 26、抗性平板上未长出菌落的原因可能是：转化失败或涂布器温度过高，一般不是培养基温度太高 27、一般选择菌落数为30～300的平板进行计数；稀释涂布平板不需要控制每个平板的菌落数 28、稀释涂布平板法和平板换线法均为分离纯化微生物的方法，用稀释涂布平板法在抗性平板上接种后，长出的单菌落无需进一步划线纯化 29、对于PCR产物电泳结果符合预期的质粒通常需进一步通过基因测序确认，原因是：电泳只能检测DNA分子的大小，无法确定DNA分子的碱基序列是否正确 30、在使用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌时，为达到良好的灭菌效果，需要注意的事项有：待灭菌的物体不易放置过挤；必须将锅内的冷空气充分排出；灭菌完毕后，不可立即打开排气阀，在压力表的压力降到零时，才能打开；锥形瓶与试管口不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包裹瓶口的纸而透入棉塞 31、基因文库是指：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因 32、探究某基因能否在真核细胞中表达的实验思路是：选择合适的运载体，利用合适的限制酶和DNA连接酶将某基因和运载体连接起来，构建基因表达载体，之后将基因表达载体导入酵母菌，检测其是否会表达相应性状 33、抗生素抗性基因的作用是：鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的受体细胞筛选出来 34、目的基因导入酵母细胞后，若要检测目的基因是否插入染色体中，需要从酵母细胞中提取基因组DNA，进行DNA分子杂交。DNA分子杂交时应使用的探针是：用放射性同位素的标记的含有乙肝病毒表面抗原基因的DNA片段。（2023全国甲卷） 35、若要通过实验检测目的基因在酵母细胞中是否表达出目的蛋白的实验思路是：从转基因酵母菌中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原—抗体杂交，观察是否有杂交带出现 36、要判断选择培养基是否具有选择作用，应如何设置对照：将相同的菌液接种到牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基上，二者同时放在相同且适宜的条件下培养，若牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目明显多于选择培养基上的数目，说明选择培养基是否具有选择作用。 37、在低渗氯化钠溶液中细胞容易吸水膨胀，染色体铺展，便于观察染色体 38、常在凝胶制备时加入核酸染料，而不是在凝胶载样缓冲液中加入核酸染料 39、如果引物设计过短，则会导致引物特异性太差，出现非特异性扩增，造成拖尾 40、一般退火温度低时也容易使引物出现非特异性扩增，造成拖尾 41、细胞培养液中加入血清的作用：为细胞提供未知的营养成分（或补充培养液中所缺乏的成分） 42、与灭活病毒疫苗相比，mRNA疫苗的优点有：能引起细胞免疫；能不断地表达出抗原；能产生更多的记忆细胞和抗体 43、构建基因表达载体首先需要用同一种限制酶切割目的基因和质粒，目的是：产生相同的末端 44、DNA连接酶的主要功能是：将切下来的双链 DNA 片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的磷酸二酯键 45、构建基因表达载体的目的是：让目的基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代，同时能够使目的基因表达并发挥作用 46、待转化完成后加入一定量植物细胞不敏感的抗生素，其目的是：杀死农杆菌 47、为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接，需在引物的5’端加上限制酶的酶切位点 48、进行谷氨酸发酵时，中性和弱碱性条件有利于谷氨酸的积累，在酸性条件下容易形成谷氨酰胺和N-乙酰氨酰胺 49、为避免平板混淆，应在“皿底”做好标记 50、DNA的粗提取与鉴定实验中，在进行DNA鉴定时，对照组试管中不加入DNA，作为空白对照组 51、发酵结束后通常使用蒸馏法获取乙醇，不能通过过滤、沉淀等方法获取乙醇 52、醋酸发酵阶段需要通气的原因是醋酸菌对氧气的含量较敏感，当进行深层发酵时，氧气不足会引起醋酸菌死亡 53、酿酒时，酵母菌通过呼吸作用产生的CO2溶于发酵液中，使发酵液酸性增加，发酵液的pH逐渐降低 54、连续细胞系是具有无限增殖能力的细胞系 55、在上述培养条件下，农药A降解菌和食细菌线虫数量在0~7d增加缓慢或减少，可能的原因是：种群基数小，需要适应新环境 56、可以利用某些特定生物对有机污染物、重金属等的富集能力将其从污染土壤中去除。若将农药A降解菌用于农药A污染的农田土壤修复，请分别从生物因素和非生物因素角度考有哪些因素会影响修复效果：生物因素：农药A降解菌与其他种类生物的种间关系；非生物因素：农药A降解菌对环境的适应能力 57、腐乳发酵时参与发酵的微生物：毛霉、曲霉、酵母，但其主要作用的是毛霉 58、根据培养基的化学成分可以把培养基分成：合成培养基和天然培养基等 59、细菌一般在30-37℃下培养1-2天 60、选取菌落数目稳定时的记录作为结果的原因：防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目 61、纤维素分解菌的筛选方法是：刚果红染色法 62、样品稀释操作成功的标志：得到2个或2个以上菌落数在30-300的平板 63、冻存的锌吸收缺陷型酵母菌株，直接在固体培养基进行划线培养，活化后接种至液体培养基，采用振荡培养以扩大菌体数量 64、在“探究土壤微生物的分解作用”实验中，将实验组土壤用塑料袋包好，放在60℃恒温箱中处理1h，目的是在尽可能排除土壤微生物作用的同时，防止土壤理化性质发生改变；对照组的土壤不做处理（自然状态） 65、湿热灭菌与干热灭菌相比，其优点是：湿热灭菌的温度较低，营养物质损失较少；湿热穿透力较强，传导较快；蒸汽具有潜热，当蒸汽与被灭菌的物品接触时，可凝结成水而放出潜热，使湿度迅速升高，加强灭菌效果 66、
明天（2024.6.9）是新高考的最后一天，希望各位和我自己都能稳定发挥，考出最好成绩！ 祝愿各位高考顺利！ |
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