斑马鱼被广泛应用于发育生物学、遗传学、毒理学以及疾病建模等领域。虽然斑马鱼本身并没有与哺乳动物相同的乳腺结构,不能直接形成类似于人类的乳腺癌模型。尽管如此,斑马鱼仍然可以在癌症研究中发挥重要作用。例如,可以通过移植人类肿瘤细胞到斑马鱼体内来创建肿瘤模型。这种方法可用于研究人类肿瘤细胞在斑马鱼体内的生长、侵袭和转移情况。通过将乳腺癌细胞系注射到斑马鱼体内,可以建立移植瘤模型。这些细胞可以在斑马鱼的特定组织或器官中形成肿瘤。斑马鱼模型可以用于大规模的药物筛选,以鉴定对乳腺癌有效的化合物。斑马鱼模型可以用来研究乳腺癌的病理学特征,包括肿瘤的组织学类型、分化程度和肿瘤微环境。 人乳腺癌斑马鱼移植瘤模型: 选取性成熟的斑马鱼按照♀∶♂=1∶3放入水中自然繁殖,收集正常胚胎放入培养池中,待胚胎发育至12 h后,在显微镜下挑去死卵,放入28 ℃孵育箱中培养。在无菌条件下将人乳腺癌MDA-MB-231细胞悬液按每毫升加入细胞染色剂氯甲基苯甲酰胺(CM-dil)7.5μL,孵育15 min后离心,弃上清液,PBS清洗后,反复2次,镜下调整细胞浓度,获得所需的细胞悬液。选取成活的2受精后天数(days postfertilization,dpf)斑马鱼胚胎,在显微镜下麻醉后将荧光标记人乳腺癌细胞微量注射至卵黄囊内,每尾约 200个细胞,然后无菌水清洗后,放入28 ℃恒温培养箱,6 h后吸去死亡斑马鱼胚胎,培养至3 dpf用于后续实验。通过荧光标记肿瘤细胞,可以在活体斑马鱼中追踪细胞的动态变化。 优势和局限: 斑马鱼的胚胎和幼鱼是透明的,可以直观地观察肿瘤的生长、侵袭和转移过程,无需进行侵入性操作。斑马鱼的生命周期较短,从受精到成体只需几个月,这有助于快速评估肿瘤发展和药物效果。斑马鱼的维护成本相对较低,且所需空间较小,适合进行大规模的遗传和药理学研究。斑马鱼的基因组易于操作,可以使用CRISPR/Cas9等技术进行基因编辑,研究特定基因在乳腺癌中的作用。斑马鱼模型可用于高通量的药物筛选,以鉴定潜在的抗乳腺癌化合物。斑马鱼具有完整的免疫系统,可以用来研究肿瘤与宿主免疫系统的相互作用。 斑马鱼与哺乳动物在生理和免疫机制上存在差异,这可能影响某些药物的疗效和肿瘤微环境的研究。斑马鱼的肿瘤可能在组织学和病理学特征上与人类乳腺癌有所不同,这可能限制了模型的临床相关性。 |
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