噻嗪敏感的氯化钠共转运蛋白NCC是体内主要的NaCl转运蛋白远端曲小管(DCT)在维持血压方面起着重要作用(Rosenbaek等,2014;冯等,2015)。NCC在Thr-53、Thr-58和Ser-71处的磷酸化是NCC功能的重要介质(Rosenbaek等人,2014)。NCC按规定循环至质膜,在刺激后,它可以被磷酸化,从而增加NCC活性并减少NCC内吞作用,同时增加DCT中的NaCl转运(Feng等人,2015)。 抗NCC(噻嗪敏感NaCl共转运体)(Thr53)抗体解决: 目录编号:p1311-53 宿主物种:兔多克隆 格式:从混合血清中亲和纯化的抗原 应用:WB(Western Blot)1:1000-1:6000,IHC(免疫组化)1:100-1:10,000 测试物种:人、小鼠、大鼠 预期反应性:豚鼠、仓鼠 免疫原:合成的磷酸化肽段,对应于小鼠NCC蛋白中Thr53周围的氨基酸残基,与钥匙孔蛤血蓝蛋白(KLH)结合。 分子量:160 kDa 引用此抗体:PhosphoSolutions 目录号p1311-53,RRID: AB_2650477 特异性:特异于在Thr53位点磷酸化的约160 kDa NCC蛋白的内源性水平。感兴趣的条带可能会因为糖基化而出现模糊。使用λ-磷酸酶处理可以完全消除免疫标记。 生产/纯化:通过在磷酸化和非磷酸化肽亲和柱上的顺序层析,从混合兔血清中亲和纯化制备。 质量控制:每批进行Western blot检测。 缓冲液:10 mM HEPES(pH 7.5),150 mM NaCl,每毫升100 µg BSA和50%甘油。 储存:建议在-20°C下储存,由于含有50%甘油,可以取出小份量而不进行冻融循环。 稳定性:自收到日期起,至少在-20°C下稳定1年。 抗NCC(噻嗪敏感NaCl共转运体)(Thr53)抗体图例: 左图:小鼠肾脏裂解物的Western blot结果显示,在第一道(-)中特异性免疫标记了约160 kDa的NCC蛋白,该蛋白在Thr53位点被磷酸化。第二道(+)显示了磷酸化特异性,其中免疫标记通过与lambda磷酸酶(λ-Ptase,1200单位处理30分钟)处理膜片被完全消除。 右图:对WT(野生型)和NCC KO(敲除型)小鼠的PFA灌注冷冻肾脏切片进行免疫染色,显示了在Thr53位点被磷酸化的NCC蛋白的特异性标记(目录号p1311-53,红色,1:100,000),在顶部可以看到,而在KO(底部)则没有染色。(图片由Lauren Miller,Ellison实验室,OHSU提供。) 抗NCC(噻嗪敏感NaCl共转运体)(Thr53)抗体文献参考: Shu, T.-T., Gao, Z.-X., Mao, Z.-H., Yang, Y.-Y., Fu, W.-J., Pan, S.-K., Zhao, Q.-Q., Liu, D.-W., Liu, Z.-S. and Wu, P. (2024). Defective natriuresis contributes to hyperkalemia in db/db mice during potassium supplementation. Journal of Hypertension. [online] Wu, P., Li, S.-T., Shu, T.-T., Mao, Z.-H., Fu, W.-J., Yang, Y.-Y., Pan, S.-K., Liu, D.-W., Liu, Z.-S. and Gao, Z.-X. (2024). Impaired distal renal potassium handling in streptozotocin-induced diabetic mice. American Journal of Physiology. Renal Physiology, [online] 327(1), pp.F158–F170. Zuchowski, Y., Carty, J.S., Trapani, J.B., Watts, J.A., Bock, F., Zhang, M., Terker, A.S., Zent, R., Delpire, E., Harris, R.C. and Arroyo, J.P. (2024). Kidney collecting ductderived vasopressin is not essential for appropriate concentration or dilution of urine. American Journal of Physiology. Renal Physiology, [online] 326(6), pp.F1091–F1100. Aly, R., Darwish, S., Bala, N., Ebrahim, A., Shoemaker, L.R., McCray, J., Garrett, T.J. and Alli, A.A. (2024). Functional and metabolomic analysis of urinary extracellular vesicles from juvenile mice with renal compensatory hypertrophy. Biochimica Et Biophysica Acta. Molecular Basis of Disease, [online] 1870(5), p.167096. Castro, P.C., Santos-Rios, T.M., Martins, F.L., Crajoinas, R.O., Caetano, M.V., Lessa, L.M.A., Luchi, W.M., McCormick, J.A. and Girardi, A.C.C. (2024). Renal upregulation of NCC counteracts empagliflozin-mediated NHE3 inhibition in normotensive but not in hypertensive male rat. American Journal of Physiology. Cell Physiology,[online] 326(6), pp.C1573–C1589. |
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