常用缓冲液的配制
当缓冲液被稀释或浓缩时，pH也应不变。其pH值应近似恒定不变，或当其中的离解的阳离子（K+、Na+）或阴离子（Cl-、Br-）被其它种类的离子替换时。
表1—4中给出了响应的配制方法，平衡阳离子为Na+，缓冲液的最终浓度为0.1mol/l，对于其它浓度的缓冲溶液或阳离子种类（通常K+）更好，表中的数据也可供参考。较稀的或较浓的缓冲溶液，及包含有不同阳离子的溶液，其pH值会与表中的数据稍有出入。在方法建立过程中，精确的流动相pH值往往并不重要，重要的是每次新配制的流动相的pH值与第一次基本相同（最好控制在±0.02范围内）。注意，只有当缓冲溶液的pH在缓冲试剂解离常数pKIa±1范围内时，缓冲溶液才具有有效的缓冲容量（如乙酸盐的pKa=4.6，其适宜的pH范围为3.6—5.6）。
表1低pH值（25℃）磷酸盐缓冲溶液的配制方法
溶液A1：0.1M磷酸。配制精确pH值缓冲液时，所用磷酸需滴定H3PO4的含量。
溶液A2：0.1M磷酸二氢钠溶液，称量13.8gNaH2PO4?H2O溶解于水中，定容于1L容量瓶中。
pHA1体积（ml）A2体积（ml）pHA1体积（ml）A2体积（ml）
2.05654352.8175825
2.24555453.0110890
2.43456553.255945
2.6250750
表2不同pH值（25℃）醋酸缓冲溶液的配制方法
溶液A1：0.1M醋酸溶液。6.0g（5.8ml）冰醋酸溶于水中，定容到1L容量瓶中。
溶液A2：0.1M醋酸钠溶液。8.2gC2H3O2Na（或13.6gC2H3O2Na?3H2O）溶解于水中定容到1L容量瓶中。
pHA1体积（ml）A2体积（ml）pHA1体积（ml）A2体积（ml）
3.6926744.8400600
3.88801205.0296704
4.08201805.2210790
4.27362645.4176824
4.46103905.696904
4.6510490
表3不同pH值（25℃）柠檬酸缓冲溶液的配制方法
溶液A1：0.1M柠檬酸溶液。21.0g柠檬酸溶于水中，定容到1L容量瓶中。
溶液A2：0.1M柠檬酸钠溶液。29.4gC6H5O7Na3?2H2O溶解于水中，定容到1L容量瓶中。
pHA1体积（ml）A2体积（ml）pHA1体积（ml）A2体积（ml）
3.0930705.0410590
3.28701265.2360660
3.48101905.4320680
3.67502605.6270726
3.87003005.8230764
4.06603406.0190810
4.26103706.2140856
4.45604406.460940
4.65104906.640960
4.84605406.830970
5.04105907.010985
5.2360660
表4中等pH值（25℃）磷酸缓冲液的配制方法
溶液A1：0.1M磷酸二氢钠溶液。13.8gNaH2PO4?H2O溶于水中，定容到1L容量瓶中。
溶液A2：0.1M磷酸氢二钠溶液。26.8gNa2HPO4?7H2O（或35.9gNa2HPO4?12H2O）溶于水中，定容到1L容量瓶中。
pHA1体积（ml）A2体积（ml）pHA1体积（ml）A2体积（ml）
5.6948527.0390610
5.8920807.2280720
6.08771237.4190810
6.28151857.6130870
6.47352657.885915
6.66853158.053947
6.8510490
表5和6给出了适于pH=7—10.6范围的两种有机碱缓冲液配制方法，这种有机碱缓冲液可以有效低减缓硅胶基柱的柱效降低。
表5高pH（25℃）甘氨酸缓冲溶液的配制方法
溶液A1：0.2M甘氨酸。15.01g甘氨酸溶于水中，定容于1L容量瓶中。
溶液A2：0.1MNaOH溶液，稀释较浓的NaOH溶液。
pHA1体积（ml）A2体积（ml）pHA1体积（ml）A2体积（ml）
8.6252.09.62511.2
8.8253.09.82513.6
9.0254.410.02516.0
9.2256.010.42519.3
9.4258.410.62522.75
表6高pH值（25℃）Tris缓冲溶液的配制方法
溶液A1：0.1MTris（三羟基氨基甲烷)7.15045.78.15026.2
7.25044.78.25022.9
7.35043.48.35019.9
7.45042.08.45017.2
7.55040.38.55014.7
7.65038.58.65012.4
7.75036.58.75010.3
7.85034.58.8508.5
7.95032.08.9507.0
8.05029.2
10硼酸-氯化钾-氢氧化钠把25.0ml0.2mol/L的硼酸-氯化钾与43.9ml0.1mol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml10.011氨基乙酸-氯化钠-氢氧化钠把49.0ml0.1mol/L氨基乙酸-氯化钠与51.0ml0.1mol/LNaOH混合均匀11.6
硼砂－碳酸钠缓冲液(pH10.8～11.2)取无水碳酸钠5.30g,加水使溶解成1000ml；另取硼砂1.91g，加水使溶解成100ml。临用前取碳酸钠溶液973ml与硼砂溶液27ml，混匀，即得。
1.甘氨酸—盐酸缓冲液(0.05mo1／L，pH2.2~3.6，25oC)
首先配制0．2mol／L甘氨酸溶液(15．01g甘氨酸溶解后定容至1L)o然后量
取25m10.2mol/L甘氨酸+xm10.2mol/L盐酸．加蒸馏水稀释至100ml。
pH 2mol/LHCl
/mL pH 2mol/LHCl
/ml 2.2
2.4
2.6
2.8 22.0
16.2
12.1
8.4 3.0
3.2
3.4
3.6 5.7
4.1
3.2
2.5
2.甘氨酸—氢氧化钠缓冲液(pH8.6~10.6，25℃)
25ml0.2mol/L甘氨酸(含Gly15.01g/L)+xml0.2mol/LNaOH,加水至100ml。
pH 0.2mol/LNaOH
/ml pH 0.2mol/LNaOH
/ml 8.6
8.8
9.0
9.2
9.4 2.0
3.0
4.4
6.0
8.4 9.6
9.8
10.0
10.4
10.6 11.2
13.6
16.0
19.3
22.8
3.邻苯二甲酸氢钾-HCl缓冲液(0.05mol／L，pH2.2~4.0，25℃)
首先配制0.1mol／L邻苯二甲酸氢钾(20.42g邻苯二甲酸氢钾溶解后定容至lL)。然后量取50m10.1mol/L邻苯二甲酸氢钾+xml0.1mol／L盐酸，加水稀释至100m1。
pH 0.2mol/LHCl
/mL pH 0.2mol/LHCl
/mL pH 0.2mol/LHCl
/mL 2.2
2.3
2.4
2.5
2.6
2.7
2.8 49.5
45.8
42.2
38.8
35.4
32.1
28.9 2.9
3.0
3.1
3.2
3.3
3.4
3.5 25.7
22.3
18.8
15.7
12.9
10.4
8.2 3.6
3.7
3.8
3.9
4.0 6.3
4.5
2.9
1.4
0.1
4.邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲液（pH4.1~5.9，25℃）
50m10.1mol/L邻苯二甲酸氢钾〔20．42g／L〕+xm10.1mol/LNaOH，加水稀释至100m1。
pH 0.1mol/LNaOH
/ml pH 0.1mol/LNaOH
/ml pH 0.1mol/LNaOH
/ml 4.1
4.2
4.3
4.4
4.5
4.6
4.7 1.2
3.0
4.7
6.6
8.7
11.1
13.6 4.8
4.9
5.0
5.1
5.2
5.3
5.4 16.5
19.4
22.6
25.5
28.8
31.6
34.1 5.5
5.6
5.7
5.8
5.9 36.6
38.8
40.6
42.3
43.7 5.磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2mol/L,pH5.8~8.0，25℃）
0.2mol/L磷酸氢二钠(含Na2HPO4·12H2071.64g／L)；0.2mo1/L磷酸二氢钠(含NaH2P04·2H2O31.21g／L)。
pH 0.2mol/L
Na2HPO4
/ml 0.2mol/L
NaH2PO4
/ml
pH 0.2mol/L
Na2HPO4
/ml 0.2mol/L
NaH2PO4
/ml 5.8
6.0
6.2
6.4
6.6
6.8 8.0
12.3
18.5
26.5
37.5
49.0 92.0
87.7
81.5
73.5
62.5
51.0 7.0
7.2
7.4
7.6
7.8
8.0 61.0
72.0
81.0
87.0
91.5
94.7 39.0
28.0
19.0
13.0
8.5
5.3 6.磷酸二氢钾—氢氧化钠缓冲液(pH5.8~8.0)
50m10.1磷酸二氢钾(13.60g／L)+xm10.1mol／LNaOH，加水稀释至100m1。
pH 0.1mol/L
NaOH
xml
pH 0.1mol/L
NaOH
xml
pH 0.1mol/L
NaOH
xml
pH 0.1mol/L
NaOH
xml 5.8
5.9
6.0
6.1
6.2
6.3 3.6
4.6
5.6
6.8
8.1
9.7 6.4
6.5
6.6
6.7
6.8
6.9 11.6
13.9
16.4
19.3
22.4
25.9 7.0
7.1
7.2
7.3
7.4
7.5 29.1
32.1
34.7
37.0
39.1
40.9 7.6
7.7
7.8
7.9
8.0 42.4
43.5
44.5
45.3
46.1
7.Tris—HCI缓冲液(0.05mo1／L，pH7~9)
25ml0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷(24.23g/L)+xml0.1mol／L盐酸，加水至100ml。
pH 0.1mol/L
/ml pH 0.1mol/L
/ml 23℃ 37℃ 23℃ 37℃ 7.20
7.36
7.54
7.66
7.77
7.87
7.96
8.05
8.14 7.05
7.22
7.40
7.52
7.63
7.73
7.82
7.90
8.00 45.0
42.5
40.0
37.5
35.0
32.5
30.0
27.5
25.0 8.23
8.32
8.40
8.50
8.62
8.74
8.92
9.10 8.10
8.18
8.27
8.37
8.48
8.60
8.78
8.95 22.5
20.0
17.5
15.0
12.5
10.0
7.5
5.0
8.巴比妥—盐酸缓冲液(pH6.8~9.6，18℃)
100m10.04mol／L巴比妥(8.25g／L)+xm10.2mol／LHCl混合。
pH 0.2mol/LHCl
/ml pH 0.2mol/LHCl
/ml pH 0.2mol/LHCl
/ml 6.8
7.0
7.2
7.4
7.6 18.4
17.8
16.7
15.3
13.4 7.8
8.0
8.2
8.4
8.6 11.47
9.39
7.21
5.21
3.82 8.8
9.0
9.2
9.4
9.6 2.52
1.65
1.13
0.70
0.35 9.硼砂—硼酸缓冲液(pH7.4~9.0)
0.05moL／L硼砂(含Na2B4O7·H2O19.07g／L)
0.2mol／L硼酸(含硼酸12.37g／L)
pH 0.05mol/L
硼砂 0.2mol/L
硼酸 pH 0.05mol/L
硼砂 0.2mol/L
硼酸 7.4
7.6
7.8
8.0 1.0
1.5
2.0
3.2 9.0
8.5
8.0
7.0 8.2
8.4
8.7
9.0 3.5
4.5
6.0
8.0 6.5
5.5
4.0
2.0 10.碳酸钠—碳酸氢钠缓冲液(0.1mol/L，pH9.2~10.8)
0.1mol／LNa2C03(含Na2CO3·10H2028.62g／L)
0.1mol／LNaHC03(含NaHC038.40g／L)(有Ca，Mg2+时不得使用)
pH 0.1mol/L
Na2CO3
/ml 0.1mol/L
NaHCO3
/ml pH 0.1mol/L
Na2CO3
/ml 0.1mol/L
NaHCO3
/ml 20℃ 37℃ 20℃ 37℃ 9.2
9.4
9.5
9.8
9.9 8.8
9.1
9.4
9.5
9.7 10
20
30
40
50 90
80
70
60
50 10.1
10.3
10.5
10.8 9.9
10.1
10.3
10.6 60
70
80
90 40
30
20
10
11.硼砂—氢氧化钠缓冲液(0.05mo1／L硼酸根，pH9.3~10.1)
0.05mo1／L硼砂(19.07g／L)25m1+xm10.2mol／LNaOH，加水稀释至1L。
pH 0.2mol/LNaOH
/ml pH 0.2mol/LNaOH
/ml 9.3
9.4
9.6 3.0
5.5
11.5 9.8
10.0
10.1 17.0
21.5
23.0
12.磷酸氢二钠—氢氧化钠缓冲液(0.025mol/L，pH11.0~11.9，25℃)
0.05mo1／LNa2HPO4(含Na2HPO4·12H2017.91g／L)50ml+xml0.1mo1／LNa0H，加水稀释至100ml。
pH 0.1mol/LNaOH
/ml pH 0.1mol/LNaOH
/ml 11.0
11.1
11.2
11.3
11.4 4.1
5.1
6.3
7.6
9.1 11.5
11.6
11.7
11.8
11.9 11.1
13.5
16.2
19.4
23.0
13.氯化钾—氢氧化钠缓冲液(0.05mol/L，pH12.0~13.0，25℃)
0.2mol／LKCl(14.91g／L)25ml+xml0.2mol／LNaoH，加水至100m1。
pH 0.2mol/LNaOH
/ml pH 0.2mol/LNaOH
/ml 12.0
12.1
12.2
12.3
12.4
12.5 6.0
8.0
10.2
12.2
16.8
24.4 12.6
12.7
12.8
12.9
13.0 25.6
32.2
41.2
53.0
66.0
14.柠檬酸—柠檬酸钠缓冲液(0.1mo1／L,pH3.0~6.2)
0.1mol/L柠檬酸(含柠檬酸·H2O21.0lg/L)
0.1mol/L柠檬酸三钠(含柠檬酸三钠·2H2O29.4g／L)
pH 0.1mol/L
柠檬酸
/ml 0.1mol/L
柠檬酸三钠
/ml
pH 0.1mol/L
柠檬酸
/m 0.1mol/L
柠檬酸三钠
/ml 3.0
3.2
3.4
3.6
3.8
4.0
4.2
4.4
4.6 82.0
77.5
73.0
68.5
63.5
59.0
54.0
49.5
44.5 18.0
22.5
27.0
31.5
36.5
41.0
46.0
50.5
55.5 4.8
5.0
5.2
5.4
5.6
5.8
6.0
6.2 40.0
35.0
30.0
25.5
21.0
16.0
11.0
8.5 60.0
65.0
69.5
74.5
79.0
84.0
88.5
92.0 15.磷酸氢二钠—柠檬酸缓冲液(pH2.6~7.6)
0.1mol/L柠檬酸(含柠檬酸·H2O21.01g／L)
0.2mo1／L磷酸氢二钠(含Na2HPO4·2H2O35.6lg/L)
Na2HPO4·2H2O分子量＝178.050.2M溶液含35.61g/LNa2HPO4·12H2O分子量＝358.220.2M溶液含71.64g/L
pH 0.1mol/L
柠檬酸
/ml 0.2mol/L
Na2HP4
/ml
pH 0.1mol/L
柠檬酸
/ml 0.2mol/L
Na2HP4
/ml 2.6
2.8
3.0
3.2
3.4
3.6
3.8
4.0
4.2
4.4
4.6
4.8
5.0 89.10
84.15
79.45
75.30
71.50
67.80
64.50
61.45
58.60
55.90
53.25
50.70
48.50 10.90
15.85
20.55
24.70
28.50
32.20
35.50
38.55
41.40
44.10
46.75
49.30
51.50 5.2
5.4
5.6
5.8
6.0
6.2
6.4
6.6
6.8
7.0
7.2
7.4
7.6 46.40
44.25
42.00
39.55
36.85
33.90
30.75
27.25
22.75
17.65
13.05
9.15
6.35 53.60
55.75
58.00
60.45
63.15
66.10
69.25
72.75
77.25
82.35
86.95
90.85
93.65 16.乙酸—乙酸钠缓冲液(0.2mol／L，pH3.7~5.8，18℃)
0.2mol／L乙酸(含冰乙酸11.7m1／L)
0.2mo1／乙酸钠(含乙酸钠·3H2027.22g/L)
pH 0.2mol/L
NaAc
/ml 0.2mol/L
HAc
/ml
pH 0.2mol/L
NaAc
/ml 0.2mol/L
HAc
/ml 3.7
3.8
4.0
4.2
4.4
4.6 10.0
12.0
18.0
26.5
37.0
49.0 90.0
88.0
82.0
73.5
63.0
51.0 4.8
5.0
5.2
5.4
5.6
5.8 59.0
70.0
79.0
86.0
91.0
94.0 41.0
30.0
21.0
14.0
9.9
6.0
|
|
