ACQUITYUPLCTM操作规程
Waters中国有限公司
ACQUITYUPLCTM操作规程
一.开机程序
首先制备新鲜流动相和清洗液(详见细则)
打开网络集线器电源
打开计算机电源,进入Windows操作系统
打开BSM和SM电源,待通过自检后
登录Empower软件,进入运行样品界面
打开控制台界面(图标在SM界面右下角)
进行仪器的Startup操作(详见细则)
设定0.1ml/min-0.2ml/min流速,冲洗检测池
当检测池出口有液体流出后,打开TUV(PDA)检测器电源
待检测器通过自检以后,在控制台界面RESET检测器
编制仪器方法,监测基线,准备开始UPLC分析实验
二.开机细则
制备新鲜流动相和清洗液
A.制备流动相及洗针液UPLC对流动相的要求
有机溶剂要求用色谱纯(进口名牌最好)
水或缓冲盐溶液要用超纯水(18.2MΩ),当天制备
B.UPLC对洗针液的要求
强洗针液用较高比例的甲醇/水或乙腈/水(例如:80/20)
弱洗针液用纯水或含少量甲醇或乙腈的水溶液(例如:10%甲醇溶液)
C.清洗柱塞密封垫(SealWash)的溶液
含5%-10%甲醇的超纯水
特别提示:以上溶剂或溶液均需:
用0.22μm的膜过滤并脱气
用洁净的玻璃容器盛放,避免污染
UPLCStartUp操作
A.首先灌注柱塞杆清洗液(PrimeSealwash)
选择Control>PrimeSealwash,点击之
至出口管有液体滴出即可停止灌注
提示:
为避免污染,请勿循环使用Sealwash清洗液
B.第二步湿灌注(WetPriming)BSM(二元溶剂管理器)
选择Control>PrimeA/BSolvents,点击之
选择A1(或A2)、B1(或B2)，时间设定为3分钟，点击start
Prime时的流速已设定为:A泵和B泵各4ml/min,
总流速为8mL/min,无需改动
C.做过BSM的wetprime之后，要准备SM样品管理器
灌注SM注射器和进样针操作
选择SampleManager,单击Control>Primesyringes
选择“Samplesyringeandwashsyringes”
在Numberofcycles中输入要作灌注的次数(默认值为1)
(建议:如果更换溶剂，做5－7次灌注)
单击OK.当系统状态是“Idle(待机),”就表示灌注做完了
接下来做冲洗进样针
在控制台的SampleManager窗口,单击Control>WashNeedle,出现WashNeedle对话框
输入需要的强洗针液的体积.默认为:0.0μL
在弱洗针框中输入弱洗针液的体积,默认值:200.0μL,建议值:200到500μL
单击OK.开始洗针过程
当洗针过程完成时,回到“Idle”状态
提示:不要使用缓冲盐作为洗针液
D.样品制备
用流动相溶样
用0.22um样品过滤膜过滤
放入WatersUPLC适用的样品瓶
提示:不要使用非Waters指定的样品瓶,以免损坏进样针
三.关机操作
用超纯水置换缓冲盐流动相,清洗色谱柱及系统(100倍柱体积)
待系统中缓冲盐冲洗干净,用乙腈/水冲洗系统
用纯有机溶剂(乙腈或甲醇)充满系统
缓慢降低流速至零,关闭TUV/PDA检测器电源,关闭SM,BSM电源
关闭网络集线器电源
退出Empower软件,关计算机
Waters
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